ICS 59.140.30 Y46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 30398—2013 皮革和毛皮 ，化学试验 致敏性分散染料的测定 Leather and fur-Chemical tests- Determination of allergenic disperse dyestuffs 2013-12-31发布 2014-12-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T30398—2013 前言 本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国皮革工业标准化技术委员会（SAC/TC252）归口。 本标准起草单位：中华人民共和国福建出入境检验检疫局、国家皮革质量监督检验中心（浙江）、中 国皮革和制鞋工业研究院、国家鞋类检测中心。 本标准主要起草人：陈学灿、连小彬、张慧敏、赵立国、王玲霞、王晓霞、李小娅 I GB/T30398—2013 皮革和毛皮化学试验 致敏性分散染料的测定 1范围 本标准规定了染色皮革、毛皮及其产品中20种致敏性分散染料的测定方法。 本标准适用于染色的皮革、毛皮产品。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 QB/T1267 毛皮成品样块部位和标志 QB/T1272 毛皮成品化学分析试样的制备及化学分析通则 QB/T2706皮革化学、物理、机械和色牢度试验取样部位 QB/T2716 皮革化学试验样品的制备 3原理 样品经甲醇超声波提取后，用具有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪（HPLC/DAD)对萃取液进 行定性、定量测定；或用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS)进行定性、定量测定。 4试剂 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的二级水。 4.1 甲醇(色谱级）。 4.2 磷酸氢二钠。 4.3 磷酸二氢钠。 4.4 乙酸铵。 4.5 乙酸。 4.6 6单组分标准储备溶液（200mg/L）：配制有效浓度为200mg/L的附录A所列的单组分分散染料 标样标准储备甲醇溶液。 4.7用于HPLC/DAD分析的标准工作溶液（5mg/L）： A组：从分散蓝1、分散蓝35、分散蓝106、分散蓝124、分散红1、分散红11、分散黄3、分散黄9、分 散橙1、分散橙3、分散橙37/76、分散棕1的单组分标准储备溶液中各取2.5mL置于同一容量瓶中，用 甲醇定容至100mL。 B组：从分散蓝3、分散蓝7、分散蓝26、分散蓝102、分散红17、分散黄1、分散黄39、分散黄49的单 4.8用于HPLC/MS/MS分析的标准溶液（2mg/L）：从单组分标准储备溶液中各移取1mL置于同一 容量瓶中，用甲醇定容至100mL。 1 GB/T30398—2013 注：单组分的标准储备液见附录A，标准工作溶液可根据需要配成其他合适的浓度。 5仪器和装置 5.1 带旋盖（有聚四氟乙烯垫片）的管状硬质玻璃提取器（50mL）。 5.2可控温的超声波浴（输出功率：420W，频率：40kHz)，70℃土2℃。 5.3 一次性注射器（2mL）。 5.4 聚四氟乙烯薄膜过滤头（0.45μm）。 5.5 高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器（HPLC/DAD)。 5.6 高效液相色谱仪：配有两级质量分析检测器（HPLC-MS/MS）。 5.7 分析天平：精确至0.001g。 6分析步骤 6.1取样 6.1.1# 标准部位取样 6.1.1.1 皮革：按QB/T2706的规定进行。 6.1.1.2毛皮：按QB/T1267的规定进行。 6.1.2非标准部位取样 如果不能从标准部位取样（如直接从鞋、服装上取样），应在可利用面积内的任意部位取样，样品应 具有代表性，对于毛皮样品，取样过程应避免毛被损失，保持毛被完好，并在试验报告中详细记录取样 情况。 6.2样品的制备和萃取 称取1g试样，精确至0.01g，置于提取器（5.1）中。往提取器中准确加入10.00mL甲醇（4.1），旋 膜过滤头（5.4）过滤，用HPLC/DAD或HPLC-MS/MS分析。 6.3HPLC/DAD方法 6.3.1HPLC/DAD分析条件 由于测试条件取决于所使用的仪器，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已被证 明对测试是合适的： 色谱柱：HC-Cl8，5μm，4.6mmX250mm或相当者； b) 流动相A：甲醇； c) 流动相B:0.005mol/L磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（pH=6.6）； 柱温：50℃； d) e) 流速：1 mL/min; f) 检测器：二极管阵列检测器（DAD)； g) 检测波长范围：200nm~700nm； h) 定量波长：360nm，420nm，460nm，570nm，630nm； i) 进样体积：20μL； 梯度淋洗程序：见表1。 心 2 GB/T30398—2013 表1液相梯度淋洗程序 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 递变方式 0 55 45 线性 15 70 30 线性 20 80 20 线性 22 95 5 线性 25 95 5 线性 28 55 45 线性 6.3.2 HPLC/DAD定性、定量分析 分别取20μL测试液、用于HPLC/DAD分析的标准工作溶液（4.7)进行HPLC/DAD分析，通过比 较试样与标样在规定的检测波长下（见附录A)色谱峰的保留时间以及紫外-可见（UV-VIS)光谱进行定 性，外标法定量。 注：采用上述分析条件时分散染料标样的HPLC保留时间、色谱图和紫外可见光谱图参见附录A、附录B和附 录C。 6.4 HPLC-MS/MS方法 6.4.1 HPLC-MS/MS分析条件 由于测试结果与使用的仪器和条件有关，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已 被证明对测试是合适的： a) 色谱柱：EclipsePlusCi8，1.8μm，2.1mmX100mm，或相当者； b) 流动相A：0.01mol/L乙酸铵溶液（用乙酸调节pH=3.6）；流动相B：甲醇； c) 柱温：40℃； (P 流速：0.2mL/min; 进样量：2μL； e) f) 梯度洗脱程序：见表2； g) 离子化模式：电喷雾电离正负离子模式； h) 质谱扫描方式：多反应监测； i) 分辨率：单位分辨率； j) 其他质谱条件参见附录D。 表 2 梯度洗脱程序 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 递变方式 0 70 30 线性 2 70 30 线性 5 10 90 线性 12,0 10 06 线性 13 70 30 线性 20 70 30 线性 3