ICS 11.220 B 41 中华人民共和国国家标准 GB/T18636—2017 代替GB/T18636—2002 蓝舌病诊断技术 Diagnostic techniques for bluetongue 2018-05-01实施 2017-11-01发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T18636—2017 目 次 前言 范围 1 2 规范性引用文件 3 临床诊断 3.1 流行病学 3.2 临床症状 3.3 病理变化 3.4 结果判定 病毒分离 4 4.1 器材 4.2 试剂 4.3 试验程序 4.4 病毒鉴定 4.5 结果判定 5 免疫酶染色 5.1 器材 5.2 试剂 试验程序 5.3 5.4 试验成立条件 5.5 结果判定 6抗原捕获酶联免疫吸附试验（AC-ELISA） 6.1 器材 6.2 试剂 6.3 样品 6.4 试验设计 6.5 试验程序 6.6 试验成立的条件 6.7 结果判定 7 定型微量中和试验 7.1 器材 7.2 试剂 7.3 试验准备 7.4 筛检试验程序 7.5 试验成立的条件 7.6 结果判定 8 蚀斑及蚀斑抑制定型试验 8.1 器材 GB/T18636—2017 8.2 试剂 8.3 蚀斑试验程序 8.4 蚀斑抑制试验程序 8.5 结果判定 9反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 9.1 器材 9.2 试剂 9.3 试验程序 10 9.4 试验成立的条件 9.5 结果判定· 10 荧光RT-PCR检测… 10.1 器材 11 10.2 试剂 10.3 试验程序 10.4 值设定 10.5 试验成立的条件 10.6 结果判定 11 琼脂免疫扩散试验（AGID) 13 11.1 器材 13 11.2 试剂 11.3 试验程序 14 11.4 结果判定 14 12 竞争酶联免疫吸附试验（C-ELISA) 15 12.1 器材 15 12.2 试剂 15 12.3 试验程序 15 12.4 读数和抑制率计算 16 12.5 试验成立的条件 16 12.6 结果判定 16 13 诊断结果判定 13.1 疑似病例 16 13.2 确诊病例 13.3 隐性感染 16 附录A（规范性附录） 细胞培养液的制备 17 附录B（规范性附录) 免疫酶染色试验用溶液的配制· 附录C（规范性附录） 酶联免疫试验和定型微量中和试验用溶液的配制 19 附录D（资料性附录) Karber方法 附录E（规范性附录） 蚀斑及蚀斑抑制定型试验· 22 附录F（规范性附录） RT-PCR试验用溶液和引物的配制 23 附录G（规范性附录) 荧光RT-PCR引物和探针的合成与配制 24 附录H（规范性附录) 琼脂平板的制备…. 25 GB/T 18636—2017 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准代替GB/T18636—2002《蓝舌病诊断技术》，与GB/T18636—2002相比，除编辑性修改外， 主要技术变化如下： —增加了临床诊断； 一增加了反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测方法； 增加了荧光RT-PCR检测方法。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会（SAC/TC181)归口。 本标准起草单位：云南省畜牧兽医科学院、中华人民共和国深圳出人境检验检验局 本标准主要起草人：李华春、朱建波、花群义、肖雷、宋建领、李乐、高林、苗海生。 本标准历次版本发布情况为： GB/T18636—2002。 SAC Ⅲ