ICS 65.120 B 46 中华人民共和国国家标准 GB 36898—2018 饲料添加剂 D-生物素 FeedadditiveD-biotin 2018-12-28发布 2020-01-01实施 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB36898—2018 前言 本标准的第1章、第4章和第6章为强制性的，其余为推荐性的。 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业农村部提出并归口。 本标准起草单位：浙江省兽药饲料监察所、浙江医药股份有限公司、浙江新和成股份有限公司、浙江 圣达生物药业股份有限公司。 本标准主要起草人：任玉琴、裘丞军、朱聪英、黄娟、张晓丽、吴望君、张厚胜、张利英、杨金枢、张伟江、 陈伶利、梅娜。 1 GB36898—2018 饲料添加剂 D-生物素 1范围 本标准规定了饲料添加剂D-生物素的化学名称、分子式、相对分子质量、化学结构式要求、试验方 法、检验规则、标签、包装、运输、贮存和保质期。 本标准适用于以烯酮或苯烯酸为原料，经化学合成制得的饲料添加剂D-生物素。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB 4806.6 6食品安全国家标准食品接触用塑料树脂 GB/T6040—2002红外光谱分析方法通则 GB/T6678—2003化工产品采样总则 GB/T6679—2003固体化工产品采样通则 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB 10648 饲料标签 GB/T13079—2006饲料中总砷的测定 GB/T21781化学品的熔点及熔融范围试验方法 毛细管法 3 3化学名称、分子式、相对分子质量和结构式 化学名称：5-[（3aS,4S，6aR)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3，4-d］咪唑-4-基］戊酸 分子式：ClHiN,O,S 相对分子质量：244.31（按2016年国际相对原子质量） 结构式： Co,! 4要求 4.1外观和性状 本品为白色或类白色的结晶或结晶性粉末。在稀碱溶液中溶解，在稀酸溶液中略溶，在水、乙醇中 极微溶解，在乙腈、丙酮和三氯甲烷中几乎不溶。 1 GB36898—2018 4.2 2技术指标 技术指标应符合表1要求。 表1技术指标 项 指 目 标 D-生物素含量（C10HiGN2OgS,以干基计)/% 97.5~101.0 干燥失重/% 比旋光度/[（）·dm²/kg] +89.0~+93.0 熔点/℃ 229~232 杂质/% 单个杂质≤1.0，杂质总量≤2.0 溶液澄清度 通过试验 炽灼残渣/% ≤0.1 重金属（以Pb计）/（mg/kg） ≤10 总砷（以As计）/（mg/kg） <2 5试验方法 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯；色谱分析中所用水应符合GB/T6682中一级水的规 定，其他分析用水应符合GB/T6682中三级水的规定；试剂和溶液制备应符合GB/T603的规定 5.1 外观检验 取试样适量，置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下观察其色泽和形态。 5.2 鉴别 5.2.1 试剂或材料 5.2.1.1 3%溴水 SAG 5.2.1.2 D-生物素对照品：纯度≥99.0%。 5.2.2 仪器设备 5.2.2.1 分析天平：感量为0.1mg。 5.2.2.2 红外光谱仪。 5.2.3鉴别试验 5.2.3.1 按GB/T6040一2002中规定的方法测试，采用溴化钾压片法制备样品，试样的红外光吸收图 谱应与D-生物素对照品的图谱一致。D-生物素对照品红外光吸收图谱参见图A.1。 5.2.3.2 褪色。 5.2.3.3 2 GB36898—2018 保留时间一致。 5.3干燥失重 5.3.1仪器设备 5.3.1.1 电热恒温干燥箱。 5.3.1.2分析天平：感量为0.1mg。 5.3.2 试验步骤 取试样约2g（精确到0.1mg），置已干燥至恒重的称量皿中，在105℃干燥4h，取出，冷却至室温， 精密称定。 5.3.3试验数据处理 干燥失重W1，以质量分数表示，数值以%计，按式（1)计算： mi-mo X 100% =1m ....(1) m2 式中： -干燥前试样和称量皿的质量，单位为克（g）； m m。—干燥后试样和称量皿的质量，单位为克（g）； m2试样质量，单位为克（g）。 测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果保留至小数点后一位。 5.4比旋光度 5.4.1 仪器设备 5.4.1.1 旋光仪 5.4.1.2 分析天平：感量为0.1mg。 5.4.2试剂或材料 NaOH溶液（0.1mol/L)：称取氢氧化钠4g，用水溶解并稀释至1L。 5.4.3试验步骤 5.4.3.1试样溶液制备 称取105℃干燥4h后冷却的试样约2g（精确到0.1mg），置100mL容量瓶中，加NaOH溶液 （5.4.2）溶解，在20℃±0.5℃下定容至刻度，摇匀。 5.4.3.2 测定步骤 在20℃士0.5℃下，将测定管用NaOH溶液（5.4.2）冲洗数次，再缓缓注入NaOH溶液（5.4.2）（注 意不要产生气泡），置于旋光仪内校正零点，同法将试样溶液（5.4.3.1）置于测定管中，置旋光仪内检测读 取，即为旋光度，使偏振光向右旋转者为右旋，以“十”符号表示；使偏振光向左旋转者为左旋，以“一”符 号表示。重复读取3次，准确至0.01°，取平均值。 5.4.4试验数据处理 D-生物素在20℃、钠光谱的D线（589.3nm）的比旋光度α㎡按式（2）计算： GB36898—2018 100α αm(20 ℃,D)= ..(2) lp 式中： α———测得的旋光度，单位为度（）； l一一旋光管的长度，单位为分米（dm）； 0——每100mL测试溶液中D-生物素的质量浓度，单位为克每毫升（g/mL）。 测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果保留至小数点后一位 5.5熔点 5.5.1 仪器设备 熔点仪。 5.5.2试验步骤 取105℃干燥4h后冷却的试样适量，按GB/T21781测定。 5.6 含量测定 5.6.1原理 试样在乙睛溶液中溶解后，用高效液相色谱仪分离，紫外检测器或二极管阵列检测器检测，按外标 法以峰面积定量。 5.6.2试剂或材料 5.6.2.1 乙腈（色谱纯）。 5.6.2.2D-生物素对照品：纯度≥99.0% 5.6.2.3 稀释液：乙腈十水=1十4。 5.6.2.4 缓冲溶液：称取一水合高氯酸钠1g，加500mL水溶解，再加1mL磷酸，用水稀释至 1 000 mL 5.6.2.5 5标准溶液：称取D-生物素对照品约40mg（精确到0.01mg），置于200mL容量瓶中，加稀释液 （5.6.2.3）约180mL，50℃超声5min使溶解，冷却，用稀释液（5.6.2.3）稀释至刻度，摇匀，用滤膜 （5.6.2.6）过滤，供高效液相色谱仪分析。 5.6.2.6 滤膜（水系，0.45μm）。 5.6.3 仪器设备 5.6.3.1 分析天平：感量为0.01mg。 5.6.3.2 高效液相色谱仪，带紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.6.4试验步骤 5.6.4.1试样溶液制备 称取105℃干燥4h后冷却的试样约40mg（精确至0.01mg），置于200mL容量瓶中，加稀释液 （5.6.2.3）适量，50℃超声5min使溶解，冷却，用稀释液（5.6.2.3）稀释至刻度，摇匀，用滤膜（5.6.2.6）过 滤，供高效液相色谱仪分析。 4 GB368982018 5.6.4.2液相色谱参考条件 色谱柱：Cts柱，柱长150mm，内径4.6mm，粒径5μm或性能相当者； 流动相：乙睛十缓冲溶液（5.6.2.4）=8.5+91.5； 流速:1.2 mL/min; 检测波长：210nm； 进样量：20μL。 5.6.4.3测定 取标准溶液（5.6.2.5）和试样溶液（5.6.4.1），注人高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积 计算。标准溶液色谱图参见图B.1。 5.6.5试验数据处理 含量2，以质量分数表示，数值以%计，按式（3）计算： A,XP ×100% :(3) AiXP2 式中： A2试样溶液色谱分析得到的D-生物素主峰面积； P1一—标准溶液中D-生物素的质量浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL)； A,—一标准溶液色谱分析得到的D-生物素主峰面积； P2—试样溶液中D-生物素的质量浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）。 测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果保留至小数点后一位。 5.6.6精密度 在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相 互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的2%，以大 于这两个测定值的算术平均值的2%的情况不超过5%为前提 5.7杂质 取试样溶液（5.6.4.1），照液相色谱参考条件（5.6.4.2）测定，记录色谱图至主成分峰保留时间的 2倍。试样溶液色谱图中如有杂质峰（扣除溶剂峰），按峰面积归一化法计算，最大单个杂质不得大于 1.0%，杂质总量不得大于2.0%。 5.8溶液澄清度 取试样0.25g（精确到1mg），加0.1mol/L氢氧化钠溶液（5.4.2)25mL使溶解，溶液应澄清无色 5.9 炽灼残渣 5.9.1试剂或材料 警示—一硫酸是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤 硫酸。 5.9.2仪器设备 5.9.2.1 分析天平：感量为0.1 mg。 5