中华人民共和国国家标准 GB5009.35—2023 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定 2023-09-06发布 2024-03-06实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 国家市场监督管理总局发布前 言 本标准代替GB5009.35—2016《食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》、GB5009.141— 2016《食品安全国家标准 食品中诱惑红的测定》、GB/T9695.6—2008《肉制品 胭脂红着色剂测定》、 GB/T21916—2008《水果罐头中合成着色剂的测定 高效液相色谱法》。 本标准与GB5009.35—2016相比,主要变化如下: ———增加了靛蓝、诱惑红、酸性红和喹啉黄4种合成着色剂; ———增加和明确了适用基质种类; ———修改了样品前处理方法和仪器条件; ———修改了检出限和定量限。 ⅠGB5009.35—2023食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定 1 范围 本标准规定了食品中合成着色剂的液相色谱测定方法。 本标准适用于食品中11种合成着色剂(柠檬黄、新红、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、 酸性红、喹啉黄和赤藓红)的测定。 2 原理 试样中的合成着色剂用乙醇氨水溶液提取,经固相萃取净化后,用配有二极管阵列检测器的高效液 相色谱仪测定,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲醇(CH4O):色谱纯。 3.1.2 甲醇(CH4O)。 3.1.3 石油醚:沸程30℃~60℃。 3.1.4 无水乙醇(C2H6O)。 3.1.5 氨水(NH3·H2O):含量20%~25%。 3.1.6 乙酸铵(C2H7O2N):色谱纯。 3.1.7 甲酸(CH2O2):含量98%。 3.2 试剂配制 3.2.1 乙醇氨水溶液:量取无水乙醇700mL,加入4mL氨水,用水稀释至1L,混匀。 3.2.2 5%甲醇水溶液:移取甲醇(3.1.2)5mL,用水稀释并定容至100mL,混匀。 3.2.3 2%氨水甲醇溶液:移取2mL氨水,用甲醇(3.1.2)稀释至100mL。 3.2.4 乙酸铵溶液(20mmol/L):称取1.54g乙酸铵,加水溶解并稀释至1000mL。 3.2.5 乙酸铵缓冲溶液,pH=9.0:乙酸铵溶液(3.2.4)加氨水调pH至9.0。 3.2.6 2%甲酸水溶液:移取甲酸2mL,用水稀释至100mL。 3.3 标准品 3.3.1 柠檬黄(CAS号:1934-21-0):纯度≥95.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.2 新红(CAS号:220658-76-4):纯度≥95.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.3 苋菜红(CAS号:915-67-3):纯度≥95.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 1GB5009.35—20233.3.4 靛蓝(CAS号:860-22-0):纯度≥90.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.5 胭脂红(CAS号:2611-82-7):纯度≥95.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.6 日落黄(CAS号:2783-94-0):纯度≥90.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.7 诱惑红(CAS号:25956-17-6):纯度≥95.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.8 亮蓝(CAS号:3844-45-9):纯度≥95.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.9 酸性红(CAS号:3567-69-9):纯度≥90.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.10 喹啉黄(CAS号:8004-92-0):纯度≥95.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.3.11 赤藓红(CAS号:16423-68-0):纯度≥90.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 标准储备液(1.0mg/mL):准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、新红、苋菜红、胭脂 红、日落黄、诱惑红、亮蓝、酸性红、喹啉黄和赤藓红各100mg(精确至0.1mg),加水溶解并分别置于 100mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀,得到浓度为1.0mg/mL的标准储备液。标准储备液可于4℃下 避光保存6个月,靛蓝标准溶液临用现配。 3.4.2 混合标准中间液(50.0μg/mL):吸取上述标准储备液(3.4.1)和靛蓝标准溶液(1.0mg/mL)各 5.00mL于100mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,得到混合标准中间液(各合成着色剂浓度均为 50.0μg/mL),临用现配。 3.4.3 标准系列工作液:吸取混合标准中间液(3.4.2)0.2mL、0.5ml、1.0mL、2.0mL、5.0mL和 10.0mL于50mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,得到标准系列工作液。浓度分别为0.2μg/mL、 0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL和10.0μg/mL。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪:带二极管阵列检测器。 4.2 天平:感量分别为1mg和0.1mg。 4.3 pH计:精度为0.01。 4.4 电动搅拌器:转速范围为30r/min~2000r/min。 4.5 涡旋混合器。 4.6 超声波发生器或恒温摇床:超声功率不小于700W,控温范围为20℃~80℃;摇床转速范围为 10r/min~500r/min。 4.7 高速离心机:转速不小于15000r/min。 4.8 固相萃取装置。 4.9 氮气浓缩装置。 4.10 WAX混合型弱阴离子交换反相吸附或等效固相萃取柱,150mg/6mL。 4.11 针筒过滤器,PVDF(聚偏氟乙烯)或PTFE(聚四氟乙烯)滤膜,孔径为0.45μm。 5 分析步骤 5.1 样品前处理 5.1.1 试样制备 液体试样和粉状固体试样应分别混合均匀,半固体试样取固液共存物进行匀浆混和,固体试样(带 核蜜饯凉果需先去核,取可食部分)经电动搅拌器粉碎等方式混合均匀,密封,制备好的试样在-18℃ 2GB5009.35—2023