中华人民共和国国家标准 GB5009.275—2016 食品安全国家标准 食品中硼酸的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.275—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T21918—2008《食品中硼酸的测定》。 本标准与GB/T21918—2008相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中硼酸的测定”; ———删除了第二法 电感耦合等离子体原子发射光谱法和电感耦合等离子体质谱法; ———增加了适用范围; ———增加了定量限; ———修改了检验结果表述。GB5009.275—2016 1 食品安全国家标准 食品中硼酸的测定 1 范围 本标准规定了食品中硼酸的测定方法。 本标准适用于水产品、肉制品(如肉丸)、豆类、面食类、腐竹、粽子、糕点、酱油、凉粉、凉皮等食品中 硼酸的测定。 2 原理 通过乙基己二醇-三氯甲烷溶液对样品中的硼酸进行快速的富集、萃取,除去共存盐类的影响,利用 硫酸与姜黄混合生成的质子化姜黄与硼酸反应生成红色产物。溶液颜色的深浅与样品中硼酸含量成正 比,通过比色可以测定样品中硼酸的含量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。 3.1 试剂 3.1.1 硫酸(H2SO4)。 3.1.2 无水乙醇(CH3CH2OH)。 3.1.3 甲醇(CH3OH)。 3.1.4 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]。 3.1.5 乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]。 3.1.6 姜黄色素。 3.1.7 冰乙酸(CH3COOH)。 3.1.8 2-乙基-1,3-己二醇[CH3CH2CH2CH(OH)CH(C2H5)CH2OH]。 3.1.9 三氯甲烷(CHCl3)。 3.1.10 硼酸(H3BO3)。 3.2 试剂配制 3.2.1 硫酸溶液(1+1):取等体积的硫酸和水,将硫酸沿烧杯壁缓慢注入水中,并用玻璃棒不断搅拌, 使热量及时散失。 3.2.2 亚铁氰化钾溶液:称取106.0g亚铁氰化钾,用水溶解,并稀释至1000mL。 3.2.3 乙酸锌溶液:称取220.0g乙酸锌,先加30mL冰乙酸溶解,用水稀释至1000mL。 3.2.4 姜黄-冰乙酸溶液:称取姜黄色素0.10g溶于100mL冰乙酸中,此溶液保存于塑料容器中。 3.2.5 2-乙基-1,3-己二醇-三氯甲烷溶液(EHD-CHCl3溶液):取2-乙基-1,3-己二醇10mL,加三氯甲 烷稀释至100mL,此溶液保存于塑料容器中。GB5009.275—2016 2 3.3 标准溶液配制 3.3.1 硼酸标准储备液:准确称取在硫酸干燥器中干燥5h以上的硼酸0.5000g,溶于水并定容至 1000mL,保存于塑料容器中。此硼酸标准储备液的浓度为500μg/mL。 3.3.2 硼酸标准溶液:取硼酸标准储备液10.00mL,加水定容至1000mL,保存于塑料容器中。此硼 酸标准溶液的浓度为5μg/mL。所配制溶液于0℃~4℃冰箱中可储存3个月。 4 仪器和设备 注:试验中使用的容器均为塑料容器。 4.1 电子天平:感量为0.01g和0.0001g。 4.2 分光光度计。 4.3 高速捣碎机。 4.4 涡旋振荡器。 5 分析步骤 5.1 试样制备 固体样品:称取经高速捣碎机捣碎的样品2g~10g(精确至0.01g)于150mL塑料烧杯中,加 40mL~60mL水混匀,缓慢滴加2mL硫酸,超声10min促进溶解混合。加乙酸锌溶液5mL,亚铁氰 化钾溶液5mL,加水定容至100mL,过滤后作为制备的试样溶液。根据样品含量取1.00mL~ 3.00mL制备的试样溶液于25mL塑料试管中,加水至5mL。加硫酸溶液(1+1)1mL,振荡混匀,加 EHD-CHCl3溶液5.00mL,盖上盖子,涡旋振荡器振摇2min,静置分层,吸取下层的EHD-CHCl3溶液 并通过ϕ7cm干燥快速滤纸过滤。过滤液作为样品测试液。 液体样品:称取样品2g~10g(精确至0.01g)于150mL塑料烧杯中,加40mL水混匀,加乙酸锌 溶液5mL,亚铁氰化钾溶液5mL,加水定容至100mL,过滤后作为制备的试样溶液。根据样品含量取 1.00mL~3.00mL制备的试样溶液于25mL塑料试管中,加水至5mL,加硫酸溶液(1+1)1mL,振荡 混匀,加EHD-CHCl3溶液5.00mL,盖上盖子,涡旋振荡器振摇2min,静置分层,吸取下层的EHD- CHCl3溶液并通过ϕ7cm干燥快速滤纸过滤。过滤液作为样品测试液。 注:如果萃取过程出现乳化现象,可将萃取液3000r/min离心3min或在测定体系中加入1mL甲醇以避免乳化 或沉淀现象,如加入甲醇应保持加水定容总体积为5mL。 5.2 标准曲线的制作 准确吸取硼酸标准溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL于25mL塑料试 管中,各加水至5mL。加硫酸溶液(1+1)1mL,振荡混匀,加EHD-CHCl3溶液5.00mL,盖上盖子,涡 旋振荡器振摇2min,静置分层,吸取下层的EHD-CHCl3溶液并通过ϕ7cm干燥快速滤纸过滤。 各取1.00mL过滤液于50mL塑料试管中,依次加入姜黄-冰乙酸溶液1.0mL,硫酸0.5mL,摇 匀,静置30min,加无水乙醇25mL,静置10min,于550nm处1cm比色皿测定吸光度。以标准系列 的硼酸含量(μg)为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。 5.3 试样溶液的测定 准确吸取样品测试液1.00mL于50mL塑料试管中,以下操作同5.2中的显色、比色步骤。测定吸 光度值,根据标准曲线得到试样溶液中硼酸的浓度。