中华人民共和国国家标准 GB5009.168—2016 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.168—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.168—2003《食品中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的测定》、 GB/T22223—2008《食品中总脂肪、饱和脂肪(酸)、不饱和脂肪(酸)的测定 水解提取-气相色谱法》、 GB5413.27—2010《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中脂肪酸的测定》、GB/T9695.2—2008《肉 与肉制品 脂肪酸测定》、GB/T17376—2008《动植物油脂 脂肪酸甲酯制备》、GB/T17377—2008《动 植物油脂 脂肪酸甲酯的气相色谱分析》、SN/T2922—2011《出口食品中EPA和DHA的测定 气相 色谱法》、NY/T91—1988《油菜籽中油的芥酸的测定 气相色谱法》。 本标准与GB/T5009.168—2003相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定”; ———增加了内标法和归一化法; ———修改了原标准中的色谱柱,将玻璃柱改为毛细管色谱柱。GB5009.168—2016 1 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定 1 范围 本标准规定了食品中脂肪酸含量的测定方法。 本标准适用于食品中总脂肪、饱和脂肪(酸)、不饱和脂肪(酸)的测定。 本标准中水解-提取法适用于食品中脂肪酸含量的测定;酯交换法适用于游离脂肪酸含量不大于 2%的油脂样品的脂肪酸含量测定;乙酰氯-甲醇法适用于含水量小于5%的乳粉和无水奶油样品的脂 肪酸含量测定。 第一法 内标法 2 原理 2.1 水解-提取法:加入内标物的试样经水解-乙醚溶液提取其中的脂肪后,在碱性条件下皂化和甲酯 化,生成脂肪酸甲酯,经毛细管柱气相色谱分析,内标法定量测定脂肪酸甲酯含量。依据各种脂肪酸甲 酯含量和转换系数计算出总脂肪、饱和脂肪(酸)、单不饱和脂肪(酸)、多不饱和脂肪(酸)含量。 动植物油脂试样不经脂肪提取,加入内标物后直接进行皂化和脂肪酸甲酯化。 2.2 酯交换法(适用于游离脂肪酸含量不大于2%的油脂):将油脂溶解在异辛烷中,加入内标物后,加 入氢氧化钾甲醇溶液通过酯交换甲酯化,反应完全后,用硫酸氢钠中和剩余氢氧化钾,以避免甲酯皂化。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 盐酸(HCl)。 3.1.2 氨水(NH3·H2O)。 3.1.3 焦性没食子酸(C6H6O3)。 3.1.4 乙醚(C4H10O)。 3.1.5 石油醚:沸程30℃~60℃。 3.1.6 乙醇(C2H6O)(95%)。 3.1.7 甲醇(CH3OH):色谱纯。 3.1.8 氢氧化钠(NaOH)。 3.1.9 正庚烷[CH3(CH2)5CH3]:色谱纯。 3.1.10 三氟化硼甲醇溶液,浓度为15%。 3.1.11 无水硫酸钠(Na2SO4)。 3.1.12 氯化钠(NaCl)。GB5009.168—2016 2 3.1.13 异辛烷[(CH3)2CHCH2C(CH3)3]:色谱纯。 3.1.14 硫酸氢钠(NaHSO4)。 3.1.15 氢氧化钾(KOH)。 3.2 试剂配制 3.2.1 盐酸溶液(8.3mol/L):量取250mL盐酸,用110mL水稀释,混匀,室温下可放置2个月。 3.2.2 乙醚-石油醚混合液(1+1):取等体积的乙醚和石油醚,混匀备用。 3.2.3 氢氧化钠甲醇溶液(2%):取2g氢氧化钠溶解在100mL甲醇中,混匀。 3.2.4 饱和氯化钠溶液:称取360g氯化钠溶解于1.0L水中,搅拌溶解,澄清备用。 3.2.5 氢氧化钾甲醇溶液(2mol/L):将13.1g氢氧化钾溶于100mL无水甲醇中,可轻微加热,加入无 水硫酸钠干燥,过滤,即得澄清溶液。 3.3 标准品 3.3.1 十一碳酸甘油三酯(C36H68O6,CAS号:13552-80-2)。 3.3.2 混合脂肪酸甲酯标准品。 3.3.3 单个脂肪酸甲酯标准品:见附录A。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 十一碳酸甘油三酯内标溶液(5.00mg/mL):准确称取2.5g(精确至0.1mg)十一碳酸甘油三酯 至烧杯中,加入甲醇溶解,移入500mL容量瓶后用甲醇定容,在冰箱中冷藏可保存1个月。 3.4.2 混合脂肪酸甲酯标准溶液:取出适量脂肪酸甲酯混合标准移至到10mL容量瓶中,用正庚烷稀 释定容,贮存于-10℃以下冰箱,有效期3个月。 3.4.3 单个脂肪酸甲酯标准溶液:将单个脂肪酸甲酯分别从安瓿瓶中取出转移到10mL容量瓶中,用 正庚烷冲洗安瓿瓶,再用正庚烷定容,分别得到不同脂肪酸甲酯的单标溶液,贮存于-10℃以下冰箱, 有效期3个月。 4 仪器设备 4.1 匀浆机或实验室用组织粉碎机或研磨机。 4.2 气相色谱仪:具有氢火焰离子检测器(FID)。 4.3 毛细管色谱柱:聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相,柱长100m,内径0.25mm,膜厚0.2μm。 4.4 恒温水浴:控温范围40℃~100℃,控温±1℃。 4.5 分析天平:感量0.1mg。 4.6 旋转蒸发仪。 5 分析步骤 5.1 试样的制备 在采样和制备过程中,应避免试样污染。固体或半固体试样使用组织粉碎机或研磨机粉碎,液体试 样用匀浆机打成匀浆于-18℃以下冷冻保存,分析用时将其解冻后使用。