中华人民共和国国家标准 GB 4789.31—2013 食品安全 国家标准 食品微生物学 检验 沙门氏菌、 志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌 的肠杆菌科噬菌体 诊断检验 2013-11-29发布 2014-06-01实施 GB 4789.31—2013 I 前 言 本标准代替 GB/T 4789.31 -2003《食品卫生微生物学检验 沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌 的肠杆菌科噬菌体检验方法》 。 本标准与 GB/T 4789.31 -2003相比 , 主要变化如下： ——修改了操作步骤； ——增加了附录 B。 GB 4789.31—2013 1 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的 肠杆菌科噬菌体 诊断检验 1 范围 本标准规定了应用肠杆菌科噬菌体诊断方法检验食品中沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌。 本标准适用于各类食品和 食源性疾病 事件样品中沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的检验。 本标准适用于食品行业从业人员肠道沙门氏菌和志贺氏菌带菌检验。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌、培养 的设备外，其他设备和材料如下： a) 恒温培养箱 ：36 ℃±1 ℃, 42 ℃±1 ℃， 50 ℃±1 ℃; b) 厌氧培养装置： 41.5 ℃±0.5 ℃; c) 显微镜： 10倍～100倍; d) 水平仪：噬菌体试验的工作台面 应调整至水平位置 ; e) 已灭菌 1 mL一次性注射器 （应为塑料材质 ），针头无编号，使用前测定每滴 5 L~10 L（每 mL有100~200 滴）可用 ; f) 微量移液器及吸头 （10 L和5 L）; g) 定量移液器及吸头 （100 L和50 L）; h) 无菌吸管：10 mL、5 mL、1 mL; i) 无菌毛细管 ; j) 无菌培养皿 ：90 mm; k) 无菌棉签 ; l) 带盖的灭菌小试管 ：8 mm×50 mm; m) 载物玻片 。 3 培养基和试剂 3.1 亚硒酸盐胱氨酸（ SC）增菌液 ：见附录 A中的 A.1。 3.2 四硫磺酸钠煌绿（ TTB）增菌液 ：见附录 A中的 A.2。 3.3 志贺氏菌（ BCT）增菌液 ：见附录 A中的 A.3。 3.4 营养肉汤（ NB）：见附录 A中的 A.4。 3.5 营养琼脂（ NA）：见附录 A中的 A.5。 3.6 营养半固体琼脂（ NSA）：见附录 A中的 A.6。 GB 4789.31—2013 2 3.7 三糖铁琼脂 （TSI）：见附录 A中的 A.7。 3.8 葡萄糖铵琼脂 ：见附录 A中的 A.8。 3.9 肠杆菌科诊断用噬菌体， 7种和 3种。必要时可再购置大肠埃希氏菌分型噬菌体（ 6种）一套。安 瓿开启后用无菌毛细管吸出移入灭菌小试管内，如果每次使用量很少，可分装于 2~3支试管内， 保存于 5 ℃冰箱备用。 3.10 沙门氏菌因子血清，志贺氏菌分型因子 血清，致泻大肠埃希氏菌分型因子血清。因子血清的种类 视需要而定。 4 检验程序 4.1 沙门氏菌的 检验程序 沙门氏菌的检验程序见图 1。