ICS 65.020 B62 DB36 江 西 省 地 方 标 准 DB 36/ T 557—2016 代替 DB36/T 557-2009 金边瑞香脱毒快繁技术规程 The technical regulation for Virus Removal and Rapid Propagation of Daphne odora var.maginata 2016 - 09 - 28 发布 江西省质量技术监督局 2016 - 12 - 01 实施 发 布 DB36/ T 557—2016 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 脱毒试管苗无性系的建立 ............................................................ 1 3 试管苗移植 ........................................................................ 2 4 上钵 .............................................................................. 2 I DB36/ T 557—2016 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由江西省林业厅提出并归口。 本标准起草单位：江西省科学院生物资源研究所、江西省大余县花卉生产办公室、江西省林业科技 推广总站。 本标准主要起草人：江洪如、金晓鹏、朱祺、李新、彭军、钟东洋、余发新、毛新琳、吕新、王碧 琴、刘腾云、高柱。 本标准与DT36/T557—2009版相比，修订如下： ——将“3.1 培养基配置”条款中 3.1.2 至 3.1.5 步骤合并调整为 3.1.2，“琼脂条”修改为“卡 那胶”,3.1.6、3.1.7 顺序分别调整为 3.1.3、3.1.4； ——将“3.3.1 接种”条款中“取出试管苗，切下顶芽以及带有 2～3 个节的下部茎段，然后”内 容删除； ——将“4.1 炼苗”条款中“20℃左右的温水”修改为“自来水”； ——将“5.1 基质”条款中“将红壤土：砻糠灰：河沙：珍珠岩按 3：1.5：0.5：0.5 配比，加入 800 倍液多菌灵消毒，装入 14×16cm 的营养钵中，再将苗高 6cm 左右小苗栽入钵内，轻浇水。” 调整为“用金边瑞香无土栽培基质或直接用泥炭土为基质，装入 14cm×16 cm 的营养钵中，再 将苗高 6 cm 左右小苗栽入钵内，轻浇水使基质湿润。”； ——将“5.2 施肥”条款中“每万盆每次施 1.5 kg”修改为“每万盆根据苗的大小每次施 10kg～ 50kg”； ——将“6 苗木分级”修改为“6 苗木分类”。 II DB36/ T 557—2016 金边瑞香脱毒快繁技术规程 1 范围 本标准规定了金边瑞香茎尖诱导培养、脱毒组培苗无性系的建立、脱毒试管苗的移栽、脱毒盆苗培 养及苗的分级、包装、检疫等。 本标准适用于江西省金边瑞香脱毒快繁。 2 脱毒试管苗无性系的建立 2.1 培养基的配置 2.1.1 配置 MS 基本培养基。 2.1.2 每升溶液中加入 5g～6 g 卡那胶，再加入所需激素种类和浓度，与基本培养基混合搅匀，pH 值 调为 5.7～5.8。 2.1.3 装瓶，瓶的大小 220 ml 左右，每瓶装培养基 35.5 ml。 2.1.4 封好瓶口后，放进灭菌锅内进行高压灭菌；灭菌的压力为 0.09 MPa，时间为 25 min。 2.2 脱毒 2.2.1 外植体处理 选择生长健壮的金边瑞香枝条作为脱毒组培苗的外植体。将嫩芽在自来水下洗净，用0.1%升汞溶液 浸泡12 min，无菌水冲洗4次～5次，无菌滤纸吸干水分，切下顶芽，然后在超净台中双筒显微镜下剥离 0.2mm～0.3 mm的茎尖，接种到预先准备好的诱导培养基中，每瓶接种5个。茎尖诱导培养需50 d～70 d。 2.2.2 茎尖的诱导培养及脱毒检测 由单个茎尖诱导获得的单芽分别转入MS+6-BA 0.5-1 mg/L+NAA0.1 mg/L的培养基中培养，待长成 2cm～3 cm高的试管苗，将茎苗再切成带有一个节的基段，继续在原培养基上培养，然后将来自不同茎 尖生长点的试管苗若干株进行脱毒检测，脱去5种病毒的苗可作为脱毒苗进行快速繁殖。 2.3 试管苗的无性系培养 2.3.1.1 接种 在超净工作台上，按芽和茎段分别接入转代增殖培养基中，每瓶放8个材料；苗直径大于1.0 mm以 上的试管苗，切下1.5cm～2.0cm高的苗则接入生根培养基中，每瓶6个。 2.3.2 培养时间 增殖培养每代50 d；生根培养30 d。 2.3.3 培养温度 增殖培养为24℃～26℃；生根培养22℃～24℃。 1 DB36/ T 557—2016 3 试管苗移植 3.1 炼苗 把要移植的生根瓶苗从培养间取出，放在室温处，打开瓶盖炼苗1 d，用自来水将根上的琼脂轻轻 洗净，切勿伤根，洗好后即可移植。 3.2 基质及配比 珍珠岩：泥炭=2：1，将珍珠岩、泥炭及50%的多菌灵1500倍液按比例均匀混合，然后装入6cm×8cm 的容器中待用。将刚洗好的生根苗移入，栽后轻浇水，使基质湿润。 3.3 置放 移植苗应置放在有防虫网的棚内；或具备500 m以上隔离条件（即500 m内没有种植传统繁殖的金边 瑞香）的棚内。 3.4 小苗管理 3.4.1 温度 小苗在棚内一般可正常管理。当棚内温度低于5℃时，则刚移栽的小苗须加小拱棚保温15 d；若棚 内温度高于30℃，则应覆盖遮阳网并喷雾降温。 3.4.2 水分 移栽苗注意保湿，但水分不能过量。 3.4.3 养分 移栽苗在30 d后，有新根生长，可喷洒0.2%磷酸二氢钾一次，隔15 d再喷洒一次。 4 上钵 4.1 基质 用金边瑞香无土栽培基质或直接用泥炭土为基质，装入14cm×16 cm的营养钵中，再将苗高6 cm左 右小苗栽入钵内，轻浇水使基质湿润。 4.2 施肥 栽苗20d～30 d后可喷0.2%磷酸二氢钾一次，以后每月施以20倍水稀释过的腐熟枯饼水溶液，每年 抽枝前施复合肥1次～2次，每万盆根据苗的大小每次施10 kg～50 kg。 4.3 打顶定干 当小苗长至10cm高时，即可打顶定干，生长一年的小苗可长成具2个～4个侧枝、高20cm的植株。 4.4 苗木分类 原种苗：长根30 d的试管苗；移栽成活苗：苗高6 cm的移栽苗。 4.5 2 检疫 DB36/ T 557—2016 外调苗木应按国务院发布的《植物检疫条例》和农业部、原林业部的《植物检疫条例实施细则》以 及《中华人民共和国进出境动植物检疫条例实施细则》严格检查把关。 _________________________________ 3