(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210673241.7 (22)申请日 2022.06.14 (71)申请人 新疆维吾尔自治区人民医院 地址 830001 新疆维吾尔自治区乌鲁 木齐 市天山区天池路91号 (72)发明人 李红燕　艾山江·玉苏甫江 　曾姗　 巩莉　朱莉　 (74)专利代理 机构 西安鼎迈知识产权代理事务 所(普通合伙) 6126 3 专利代理师 李振瑞 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6806(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 用于检测EOPD的试剂盒及其应用 (57)摘要 本发明公开了用于检测EOPD的试剂盒及其 应用， 通过选用VPS35基因及EIF4 G1基因特定SNP 位点作为分子标记物， 匹配特异性引物及相适应 的扩增体系， 制备获得用于检测EOPD的试剂盒， 通过提供的试剂盒能够检测外周血中上述标志 物的含量； 本发明提供的用于检测EOPD的试剂盒 具有高度稳定性、 特异性和敏感性， 灵敏度和特 异度均具有较高水平， 有较高的临床参考价值。 本申请提供的用于检测EOPD的试剂盒及应用对 于EOPD的基因诊断及预防策略研究具有十分重 要的意义。 权利要求书1页 说明书5页 附图1页 CN 115181796 A 2022.10.14 CN 115181796 A 1.用于EOPD检测的试剂盒， 其特征在于， 所述的标记物包括鉴别p.r1205H和P.A502V两 种突变体的标记 物的组合。 2.如权利要求1所述的用于EOPD检测的试剂盒， 其特征在于， 能够检测外周血中 rs200221361突变位 点的相关组分。 3.如权利要求2所述的用于EOPD检测的试剂盒， 其特征在于， 所述的试剂盒含扩增 rs200221361突变位 点用于区分p.r120 5H和P.A502V两种突变 体的引物。 4.如权利 要求3所述的用于EOPD检测的试剂盒， 其特征在于， 所述的p.r 1205H突变体的 正向引物如SEQ  ID NO.1所示， p.r12 05H突变体的反向引物如SEQ  ID NO.2所示； P.A502V的 正向引物如SEQ  ID NO.3所示， P.A5 02V的反向引物如SEQ  ID NO.4所示。 5.如权利要求1至权利要求4任意一项所述的用于EOPD检测的试剂盒， 其特征在于， 试 剂盒扩增体系包括： 12.5μL2 ×Taq PCR主混合物， 2μLDNA模板， 上下游引物各1μL， 8.5μL   ddH2O。 6.如权利要求6所述的用于EOPD检测的试剂盒， 其特征在于， 试剂盒扩增条件为： 在94 ℃下预变性5min， 94℃变性30秒， 55℃退火30秒， 在72℃延伸1min， 35个循环， 最终在72℃延 伸10min。 7.如权利要求1至权利要求4任意一项所述的用于EOPD检测的试剂盒在筛查EOPD中的 应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115181796 A 2用于检测EOPD的试剂盒及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 具体 的， 本发明涉及用于检测早发型PD的试剂盒及其 应用的技 术领域。 背景技术 [0002]帕金森病(parkinson ’s disease， PD)又称为震颤麻痹， 由1817年英国医师 James.Par kinson首先描述。 该疾病常见于中老年人群中， 属于一种常见的慢 性进展性神经 系统变性病。 该病的主要病理特征是在黑质致密区及蓝斑区的神经元色素脱失， 黑质色素 变淡， 多巴胺神经元变性伴胞浆内嗜酸包涵体即Lewy小体形成， 导致中脑黑质纹状体通路 破坏及尾状核、 壳核中多巴胺含量减少， 而黑质纹状体系统中与多巴胺(DA)功能拮抗的乙 酰胆碱(Ach)作用相对亢进， DA与Ach平衡破坏， 从而产生PD的各种临床表现。 我国属PD高发 地区， 65岁以上人群PD患病率1.7％， 且每年平均新增约100万PD病人。 PD主要临床表现为姿 势反射障碍、 运动迟缓、 肌张力增高和静止性震颤 。 [0003]PD多发于老年人， 60岁以上的人群中发病率1％， 80岁以上的人群高达4％。 早在 1987年有学者就提出为更好的治疗及预测疾病的预后， 将PD分为早发型PD和晚发型PD。 早 发型PD定义为发病年龄小于40岁， 部分患者发病呈家族 聚集现象， 约占全部PD患者的4％ ‑ 10％,但日本学者报道发病率在18.4％， 与晚发型PD(发病年龄大于40岁)相比， 其发病率、 临床表现及预后均有不同。 [0004]目前国内外临床报道病例较少， 因其确诊时间较晚， 可能影响临床特征统计 的结 果。 尚不清楚早 发型PD非运动症状、 头颅影像学等特征方面与晚发型PD有何不同， 治疗方案 是否应当有所不同， 长期使用受体激动剂等药物是否加重认知损害等。 因而研究早发型及 晚发型PD的差异对PD的早期诊断、 治疗具有重要意义。 McDermott等将48例早发型PD患者与 123例晚发型PD患者进行对照， 发现早发型帕金森病(early ‑onset Parkinson’s disease, EOPD)患者多出现震颤， 而晚发性帕金森病(Late  Onset ofParkin son's Disease， LOPD)患 者更多表现为运动迟缓 ‑强直(postural  instability  and gait disturbance,PIGD)。 EOPD患者一般对左旋多巴反应好， 但是更容易出现运动障碍和剂末现象。 另外， EOPD疾病进 展慢， 肌张力障碍和左旋多巴诱发性运动障碍发生率更高， 较少出现运动和认知障碍。 较 LOPD患者更容 易受到精神心理方面的影响， 如失业、 家 庭生活被干扰、 感觉耻辱和抑郁。 发明内容 [0005]针对现有技术中未见报道专门针对EOPD检测有高度稳定性、 特异性和敏感性的试 剂盒研究的技术现状， 本发明旨在提供用于检测 EOPD的试剂盒及其在检测 EOPD中的应用， 且具有高度稳定性、 特异性和敏感性， 灵敏度和特异度均具有较高水平， 有较高的临床参考 价值。 本申请提供的用于检测E OPD的试剂盒及应用对于E OPD的基因诊断及预防策略研究具 有十分重要的意 义。 [0006]本发明提供用于EOPD检测的试剂盒， 所述的标记物包括鉴别p.r1205H和P.A502V说　明　书 1/5 页 3 CN 115181796 A 3