(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210758382.9 (22)申请日 2022.06.30 (66)本国优先权数据 202111317475.X 2021.1 1.09 CN (71)申请人 青岛农业大 学 地址 266109 山东省青岛市城阳区长城路 (72)发明人 张恩盈　程丽巧　 (74)专利代理 机构 上海怡恩专利代理事务所 (普通合伙) 31336 专利代理师 牟俊玲 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发 及应用 (57)摘要 本发明公开了玉米S型胞质不育基因KASP分 子标记的开发及应用， 属于生物技术领域。 它采 用鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育的方法， 此 方法包括检测待测玉米的基因型， 根据待测玉米 的基因型鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育； 所 述基因型为玉米基因组 中KASP_S位点的基因型； 所述KASP_S位点是玉米 叶绿体基因组中的一个 InDel位点， 位于玉米叶绿体基因组第11860位， 所述InDel位点是核苷酸种类为+或者 ‑。 本发明 所提及的标记KASP_S在玉米S型胞质不育植株筛 选中具有较高的实用性。 权利要求书2页 说明书8页 序列表1页 附图1页 CN 115125326 A 2022.09.30 CN 115125326 A 1.玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发， 采用鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育 的方法， 其特征在于， 此方法包括检测待测玉米的基因型， 根据待测玉米的基因型鉴定或辅 助鉴定玉米S型胞质不育； 所述基因型为玉米基因组中KASP_S位点的基因型； 所述KASP_S位 点是玉米叶绿体基因组中的一个InDel位点， 位于玉米叶绿体基因组第11860位， 所述InDel 位点是核苷酸种类为+ 或者‑， 为SEQ ID No.4的第101 ‑183位核苷酸； 所述KASP_S位点的基因型为++基因型或+ ‑基因型的待测玉米为S型胞质不育或者候选 为S型胞质不育， 所述KASP_S位点的基因型为CC基因型的待测玉米为可育或者候选为可育； 所述KASP_S位点的基因型为+ ‑基因型的待测玉米与所述KASP_S位点的基因型为++基因型 的待测玉米在S型胞质不育性状上无显著差异； 其中， 所述++基因型表示玉米基因组中所述 KASP_S位点的核苷酸种类为+ 的纯合型； 所述 ‑‑基因型表示玉米基因组中所述KASP_S位点 的核苷酸种类为 ‑的纯合型； 所述+ ‑基因型表示玉米基因组中所述KASP_S位点的核苷酸种 类为+和‑的杂合型。 2.根据权利要求1所述的方法在玉米育种中的应用。 3.根据权利要求1所述的玉米S型胞质不育基因KASP分子标记 的开发而提出的一种应 用， 其特征在于： 检测所述KASP_S位点的多态 性或基因型的物质在鉴定或辅助鉴定玉米S型 胞质不育中的应用。 4.根据权利要求1所述的玉米S型胞质不育基因KASP分子标记 的开发而提出的一种应 用， 其特征在于： 检测所述KASP_S位点的多态性或基因型的物质在制备鉴定或辅助鉴定玉 米S型胞质不育的产品中的应用。 5.根据权利要求1所述的玉米S型胞质不育基因KASP分子标记 的开发而提出的一种应 用， 其特征在于： 检测所述KASP_S位点的多态性或基因型的物质在玉米辅助育种或制备玉 米辅助育种产品中的应用。 6.根据权利要求2所述的应用， 所述应用中包括玉米育种的方法， 其特征在于： 包括选 择所述KASP_S位点的基因型为 ++或者基因型为 +‑的玉米作为亲本进行育种， 所述 ++基因型 表示玉米基因组中所述KASP_S位点的核苷酸种类为+的纯合型； 所述+ ‑基因型表示玉米基 因组中所述KASP_S位点的核苷酸种类为+和 ‑的杂合型； 所述玉米育种可为S型胞质不育玉 米。 7.根据权利要求1所述的玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发而得到的产品， 其 特征在于， 产品为C1 ‑C3中任一一种产品： C1： 检测与玉米S型 胞质不育相关的I nDel多态性或基因型的产品； C2： 鉴定或辅助鉴定玉米S型 胞质不育的产品； C3： 用于玉米辅助育种的产品。 8.根据权利要求3 ‑5中任一所述的应用或权利要求7所述的产品， 其特征在于： 检测 KASP_S位点的多态性或基因型的物质为如下D1、 D2或D3： D1： 所述检测权利要求1中KASP_S位点的多态性或基因型的物质含有扩增包括所述 KASP_S位点在内的玉米 基因组DNA片段的PCR引物； D2： 所述检测权利 要求1中KASP_S位点的多态性或基因型的物质为含有所述PCR引物的 PCR试剂； D3： 含有D1所述PCR引物或D2所述PCR试剂的试剂盒。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115125326 A 29.根据权利要求8所述的应用或产品， 其特征在于： 所述PCR引物为由核苷酸序列是序 列表中SEQ  ID No.1的第22 ‑52位的单链DNA、 核苷酸序列 是序列表中SEQ  ID No.2的第22 ‑ 52位的单链DNA和核苷酸序列是序列表中SEQ  ID No.3的单链DNA组成的引物组。 10.根据权利 要求8或9所述的应用或产品， 其特征在于： 所述PCR引物为由序列表中SEQ   ID No.1所示的单链DNA、 序列表中SEQ  ID No.2所示的单链DNA和由序列表中SEQ  ID No.3 所示的单链DNA的引物组。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115125326 A 3