(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211379111.9 (22)申请日 2022.11.04 (71)申请人 北京中科昆朋生物技 术有限公司 地址 100089 北京市海淀区学院路3 0号科 大天工大厦AB座20层0 6室 申请人 中国科学院昆明动物研究所 (72)发明人 管思聪　王国栋　李桂梅　王晓阳　 (74)专利代理 机构 北京智信禾专利代理有限公 司 11637 专利代理师 张小娜 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 检测罗威纳犬犬种的引物组、 试剂盒、 基因 芯片和方法 (57)摘要 本申请提供检测罗威纳犬犬种的引物组、 试 剂盒、 基因芯片和方法， 其中所述检测罗威纳犬 犬种的方法包括： 采集待检测犬的基因信息； 对 所述基因信息进行扩增， 通过预设引物组对扩增 后的基因信息进行检测， 获得预设数量的待检测 基因位点信息集合； 将所述待检测基因位点信息 集合与参考基因位点信息集合进行比对； 根据比 对结果确定所述待检测犬对应的罗 威纳犬犬种 信息。 通过本方法， 利用少量高频基因突变位点 鉴定罗威纳犬的方法， 直接获得鉴定结果， 不用 依赖相关鉴定人员的鉴定经验， 检测准确性高、 可重复性高， 鉴定时间短。 权利要求书4页 说明书16页 附图4页 CN 115491426 A 2022.12.20 CN 115491426 A 1.一种检测罗威纳犬犬种的引物组， 其特征在于， 所述引物组包括如下至少一个引物 对： (1)第1引物对， 用于检测2号染色体、 第7380 6945位点， 包括： 上游引物5' ‑GGGTGGAAGAAGAGCCCCGTCCCTCCGGGCCGCAC‑3'； 下游引物5' ‑TCTGACCATGAACTTTTACGTCCATTAATCTACCG‑3'； (2)第2引物对， 用于检测2号染色体、 第7381095 0位点， 包括： 上游引物5' ‑CGAGGTCGTCGAG GACCCCCGACGTCGAGTC CTAC‑3'； 下游引物5' ‑ACACCGTCTAGGGCTGGTGCACCGACGTGAC CCCC‑3'； (3)第3引物对， 用于检测4 号染色体、 第389040 08位点， 包括： 上游引物5' ‑GAGAACGACACCGAGGTACAGTTGATGAGAC CATC‑3'； 下游引物5' ‑TCCGGTGGACAGAAAGAGTACG GAAGGGTCTTAAA‑3'； (4)第4引物对， 用于检测4 号染色体、 第5872 2924位点， 包括： 上游引物5' ‑GAGGAGTGATGAGAGACTCAGTAG GAACCTGTAGA‑3'； 下游引物5' ‑CCGGAACCGGACCCACCGACGTCCGGGACGGAAGA‑3'； (5)第5引物对， 用于检测5号染色体、 第718045 01位点， 包括： 上游引物5' ‑AAGAATGACCATACCGGATGGACGTACTACTG GGG‑3'； 下游引物5' ‑GTCACAGGTTGTAGACGTA AAATATAAACATACCT‑3'； (6)第6引物对， 用于检测6号染色体、 第18473179位 点， 包括： 上游引物5' ‑TTCTGACCCGAAGAAGACACAGA ACGTGTGC CCCG‑3'； 下游引物5' ‑CAACCCTCGTGAAATCGGTAGGAGGGACGACGACG ‑3'； (7)第7引物对， 用于检测6号染色体、 第21 165970位点， 包括： 上游引物5' ‑ATTGAACCACGACCACTGGACCCCATTTACTATGA ‑3'； 下游引物5' ‑AAATCAAAGGAATAGGGAAAAACCCTTCTAATCAT‑3'； (8)第8引物对， 用于检测6号染色体、 第5 0497935位点， 包括： 上游引物5' ‑AAAGGGACAAAAATCTGTTAAGAACCACAACTAAA‑3'； 下游引物5' ‑TTAAGCACCTTATAGAGTC CCCAACAGTCGA ATGT‑3'； (9)第9引物对， 用于检测8号染色体、 第3 3516692位点， 包括： 上游引物5' ‑TAGATATGTCTCTAGTACAG GTTTATGAGTA AATG‑3'； 下游引物5' ‑ACCAATATGTATGCGT TGATTGAACGGTATAGGAT‑3'； (10)第10引物对， 用于检测10号染色体、 第3 0118987位点， 包括： 上游引物5' ‑GTAGTATC CTTGGACTACCTTAACAGACAAACCAC‑3'； 下游引物5' ‑GAAAGAAGGAGAAGGAAACTGGGACCCCCTGACTA‑3'； (11)第11引物对， 用于检测12号染色体、 第6 3266965位点， 包括： 上游引物5' ‑CGAGATGT TCTTACCAAACTAAACTCCAAAGGTCG‑3'； 下游引物5' ‑GCTGTTATTAACATTTTAAACTGAATCCGTATAAA‑3'； (12)第12引物对， 用于检测12号染色体、 第6 3812581位 点， 包括： 上游引物5' ‑ATTCTGTGTCATACAT TTGTAACTAGTGAC CCGAG‑3'； 下游引物5' ‑GTGTAAAACAGAGCTCTGTG GGGTCGACGAT TAGA‑3'； (13)第13引物对， 用于检测16号染色体、 第4 4867315位 点， 包括：权　利　要　求　书 1/4 页 2 CN 115491426 A 2上游引物5' ‑CATTCAGTTTGTGGAGTTTCTTATTAACCTCGGGT‑3'； 下游引物5' ‑CCGGACCTACACAAGACTTTGGGACCTTAGTAAGT‑3'； (14)第14引物对， 用于检测16号染色体、 第5 0274021位 点， 包括： 上游引物5' ‑CTTCCCCGTGTACCTTAGTTTAAACACGACTA AGT‑3'； 下游引物5' ‑GACTCTAC CCTGTTATTCTTGTTAGCGGACTGAAA‑3'； (15)第15引物对， 用于检测19号染色体、 第23 676295位点， 包括： 上游引物5' ‑CTCGGGAGTGCCACCGATAATGAGTCACA AGGTTG‑3'； 下游引物5' ‑ACAGACCACTTCTACACCTGACACCTACCTTTCTA‑3'； (16)第16引物对， 用于检测19号染色体、 第41404983位 点， 包括： 上游引物5' ‑CCCTATTCTCGATCAG GTCAAGAATGTAGTGT TAT‑3'； 下游引物5' ‑TAAGTACAGTACT TTCACAAAGGAGACCTATCAAA‑3'； (17)第17引物对， 用于检测20号染色体、 第2 2619674位点， 包括： 上游引物5' ‑TTTCCCTTAGTTTTCCGTCGTTACTACAG GTTCTT‑3'； 下游引物5' ‑GGCTACTACGACTACGACT TCTTCTACTTCCCCTG‑3'； (18)第18引物对， 用于检测20号染色体、 第2397979 9位点， 包括： 上游引物5' ‑CGAGAAGGGACAAGTCACCTAAGTCCACTTTGAGT‑3'； 下游引物5' ‑TACCGGGAACACGAACTGGATGGACAGAAAGGGTA‑3'； (19)第19引物对， 用于检测20号染色体、 第2412 9057位点， 包括： 上游引物5' ‑GAGGAACAACGTTGTGATGT TTCAAATGTCCTTGT‑3'； 下游引物5' ‑CAGTGTCAC CTTGTTTTCGGACCTCGACCACCACA‑3'； (20)第20引物对， 用于检测20号染色体、 第249528 89位点， 包括： 上游引物5' ‑AGTATACCGATCTCGTATA ATAGAGAAGAAAACTC‑3'； 下游引物5' ‑ACGAACGCCCGGAGTACACGTATCTCTA AATAGTT‑3'； (21)第21引物对， 用于检测20号染色体、 第26876 325位点， 包括： 上游引物5' ‑TATTCGGATGACAC CAGGTCAGAAGGTGATAAGGT‑3'； 下游引物5' ‑TGAAGACGATAC CTACAAAAACATGTAT TCAGAAA‑3'； (22)第22引物对， 用于检测20号染色体、 第5 0496449位点， 包括： 上游引物5' ‑AGGCCCGAGTCCTCCCAGAGCAGCG GCAGCATC CC‑3'； 下游引物5' ‑CTCGCCTTCGCCTGCGGGAGGAGGCAGTGGAGCCT‑3'； (23)第23引物对， 用于检测21号染色体、 第4731 1975位点， 包括： 上游引物5' ‑CAACAGGATCATAT TCCATTTTGTTTAGTTCTTGG‑3'； 下游引物5' ‑AGACCATCATACT TTGGGGTCGAGACGACGACAC C‑3'； (24)第24引物对， 用于检测2 2号染色体、 第47943170位 点， 包括： 上游引物5