(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210667119.9 (22)申请日 2022.06.13 (71)申请人 中国人民解 放军总医院 地址 100853 北京市海淀区复兴 路28号 (72)发明人 张春燕　田亚平　何昆仑　李春宝　 崔佳奕　李锦　 (74)专利代理 机构 杭州宇信知识产权代理事务 所(普通合伙) 33231 专利代理师 张宇娟 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6837(2018.01) (54)发明名称 检测32个位点基因突变的试剂在制备体能 检测产品中的应用 (57)摘要 本发明公开了检测32个位点基因突变的试 剂在制备体能检测产品中的应用， 所述试剂包括 体能基因32个常见突变位点区域进行扩增的引 物， 利用该试剂可实现一次性检测体能相关基因 32个突变位点， 灵敏度高、 特异性强、 准确性高， 并且操作简便、 低成本、 高通量， 检测快速， 结果 自动判读， 易于推广应用。 利用本发明的方案可 根据中国人群GWAS研究及数据库开发了一套软 件报告系统， 根据PRS 模型计算， 通过检测结果得 到运动相关的风险， 进而可以辅助更加科学合理 的制定个人运动计划 和训练强度。 权利要求书1页 说明书17页 序列表15页 CN 115011707 A 2022.09.06 CN 115011707 A 1.检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品中的应用， 其特征在于： 所述32 个位点为rs12722、 rs10887741、 rs1815739、 rs2253206、 rs11549465、 rs1042713、 rs3764352、 rs12612420、 rs6265、 rs2073711、 rs1800795、 rs363050、 rs800562、 rs699、 rs1842129、 rs12143842、 rs2016520、 rs4665058、 rs679620、 rs1799945、 rs363039、 rs4783307、 rs2267668、 r s4994、 rs591058、 rs1799722、 r s8097348、 r s1800012、 rs8192678、 rs4948418、 rs1208和rs176 02729。 2.根据权利要求1所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品中的应用， 其特征在于： 所述试剂为32个检测位点的扩增引物， 所述扩增引物如SEQ  ID NO.1～SEQ  ID  NO.64所示。 3.根据权利要求1所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品中的应用， 其特征在于： 所述试剂还 包括所述检测位 点的单碱基延伸引物。 4.根据权利要求3所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品中的应用， 其特征在于： 所述单碱基延伸引物如SEQ  ID NO.65～SEQ ID NO.96所示。 5.根据权利要求2或3任一项所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品 中的应用， 其特征在于： 所述扩增引物各序列的浓度为0.3～3 μM； 所述延伸引物各序列的浓 度为3～3 0 μM。 6.根据权利要求1～5任一项所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品 中的应用， 其特征在于： 所述试剂还包括消化扩增 体系中多余dNTPs和引物的反应试剂、 除 盐试剂和检测芯片。 7.根据权利要求6所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品中的应用， 其特征在于： 所述反应试剂为SAP酶和SAP反应混合液； 所述除盐试剂为阳离子交换树脂粉 末。 8.根据权利要求6所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品中的应用， 其特征在于： 所述检测芯片为包括含384个已预点基质的检测点硅基芯片。 9.根据权利要求1所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品中的应用， 其特征在于： 所述试剂还包括PCR扩增缓冲液， Mg2+、 dATP、 dCTP、 dTTP、 dUTP、 dGTP、 Taq酶和 UNG酶。 10.根据权利要求1所述检测32个位点基因突变的试剂在制备体能检测产品中的应用， 其特征在于： 所述检测产品采用飞行时间质谱检测系统进行质谱检测。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115011707 A 2检测32个位点 基因突变的试剂在制备 体能检测产品中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子诊断技术领域， 具体涉及检测32个位点基因突变的试剂在制备体 能检测产品中的应用。 背景技术 [0002]体能相关基因检测是一项基于飞行时间核酸质谱平台的创新型基 因检测技术， 通 过采集受检者的口腔粘膜样 本， 对样本中的DNA进 行核酸质谱分析， 得出 受检者是否存在运 动相关基因突变， 了解个人运动天赋， 为制定运动计划 和训练强度提供检测依据。 [0003]运动实践表明： 一个人运动遗传素质的优劣决定其运动能力的上限及可训练性的 程度。 其中最 根本的原因就在于不同的个 体遗传背景不同， 即存在运动天赋的差异。 [0004]一、 先天遗传决定性状特征之差异。 人类的生物学性状一方面受遗传控制， 另一方 面又受环境制约。 运动员对训练刺激有多 大的反应， 在很大的程度上取决于遗传度的高低。 对一些遗传度较高的性状， 如耐力、 最大摄氧量、 红白肌纤维比例等， 很难通过训练来 提高。 [0005]二、 性状差异决定运动能力之 高低。 研究显示， 良好的身体性状特征是杰出运动能 力获得的必要条件， 决定着运动能力发展的空间。 近年来分子遗传学研究多次证实与人类 运动能力相关的诸如肌肉力量、 耐力、 平衡力、 协调性、 柔韧性、 有氧运动能力、 无氧运动能 力、 训练应答以及疲劳的发生发展等都有重要的生物学背景。 在环境条件和训练方式大致 相同的情况下， 不同个体在运动能力、 体能、 领悟力以及训练应答等方面 都存在着明显的差 异。 因此， 要想在某些运动项目上获得优异的运动成绩， 良好的身体性状特征是最基本的条 件。 体能相关基因检测可以为运动员 在制定运动计划和训练强度上提供了必要的依据， 在 对身体条件安全的情况下， 更大限度的提高训练效率， 使运动员能够有更加科学合理的训 练计划， 取得更好的成绩。 当然， 体能相关基因检测同样也适用于学生， 以及想要培养某一 项专业运动项目的人， 可以全面的了解个人的运动能力， 在选择运动项目时提供科学 的建 议。 [0006]基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix  Assisted  Laser Desorption   Ionization T ime‑of‑flight Mass Spectrometry， MALDI ‑TOF MS)的基本原理是将分析物 分散在基质分子中并形成晶体， 当用激光照射晶体时， 由于基质分子经辐射所吸收的能量， 导致能量蓄积并迅速产热， 从而使基质晶体升华， 致使基质和分析物膨胀并进入气相。 MALDI所产生的质谱图多为单电荷离子， 因而质谱图中的离子与多肽和蛋白质的质量有对 应关系， 并以质/荷比计算分子量。 MALDI产生的离子常用飞行时间(Time ‑of‑Flight,TOF) 检测器来检测， 最后根据到达检测器的飞行时间不同而被检测， 即通过离子的质量电荷之 比(M/Z)与离子的飞行时间成正比来分析离子， 并测得样品分子的分子量。 MALDI ‑TOF质谱 很适合用于对蛋白质、 多肽和多糖、 核酸等生物大分子的研究。 因其具有测定质量范围宽、 灵敏度高、 速度快、 精确度高及 对盐的耐受性较好等优点， 已广泛应用于蛋白质及多肽的分 子量和序列测定 。 [0007]本发明的体能相关基因位点进行MALDI ‑TOF质谱检测存在的难点： 各检测位点 的说　明　书 1/17 页 3 CN 115011707 A 3