(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210640799.5 (22)申请日 2022.06.08 (71)申请人 郑州安图生物工程股份有限公司 地址 450016 河南省郑州市经济技 术开发 区经北一路87号 (72)发明人 马玮域　李进福　高利飞　王万利　 张利红　 (74)专利代理 机构 北京集佳知识产权代理有限 公司 11227 专利代理师 张柳 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12Q 1/689(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01)C12R 1/35(2006.01) C12R 1/01(2006.01) C12R 1/93(2006.01) (54)发明名称 引物、 探针和试剂盒检测呼吸道病原 体中的 应用 (57)摘要 本发明涉及生物检测， 尤其涉及引物、 探针 和试剂盒检测呼吸道病原体中的应用。 本发明提 供了引物组包括： 引物组1至引物组12中的一个 或多个。 本发 明提供的引物和探针具有良好的特 异性， 结合real  time PCR检测方法， 能够实现对 FluA、 FluB、 RSV、 MP、 CPn、 ADV、 HPIV1、 HPIV2、 HPIV3、 HMPV ‑A、 HMPV‑B、 LP的快速、 准确、 灵敏 的 鉴定， 本发明检测方法具有便于操作， 具有快速、 简便、 特异等特点， 对个体患者症状控制及疾病 传播的预防提供了一种高效的检测方法。 权利要求书6页 说明书19页 序列表10页 附图2页 CN 115058540 A 2022.09.16 CN 115058540 A 1.引物组， 其特 征在于， 包括： 引物组1至引物组12中的一个或多个； 引物组1： 用于扩增甲型流感病毒的引物组具有： (I)、 如SEQ  ID NO:1和SEQ  ID NO:2所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或 (Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组2： 用于扩增乙型流感病毒的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:4和SEQ  ID NO:5所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或 (Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组3： 用于扩增呼吸道合胞病毒的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:7和SEQ  ID NO:8所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或 (Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组4： 用于扩增肺炎支 原体的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:10和SEQ  ID NO:11所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或 (Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组5： 用于扩增肺炎衣原体的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:13和SEQ  ID NO:14所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或权　利　要　求　书 1/6 页 2 CN 115058540 A 2(Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组6： 用于扩增腺病毒的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:16和SEQ  ID NO:17所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或 (Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组7： 用于扩增副流感1型病毒的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:19和SEQ  ID NO:20所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或 (Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组8： 用于扩增副流感2型病毒的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:22和SEQ ID NO:23所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或 (Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组9： 用于扩增副流感3型病毒的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:25和SEQ  ID NO:26所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得 的核苷酸序列， 且与(I)或(I I)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列； 或 (Ⅳ)、 与(I)、 (II)或( Ⅲ)所述核苷酸序列具有至少90％序列同源性的核苷酸序列； 和/ 或 引物组10： 用于扩增人偏肺病毒A型的引物具有： (I)、 如SEQ  ID NO:28和SEQ  ID NO:29所示的核苷酸序列； 或 (II)、 与(I)所示的核苷酸序列编码相同蛋白质， 但因遗传密码的简并性而与(I)所示 的核苷酸序列不同的核苷酸序列； 或 (Ⅲ)、 与(I)或(II)所示的核苷酸序列经取代、 缺失或添加一个或多个核苷酸序列获得权　利　要　求　书 2/6 页 3 CN 115058540 A 3