(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210710198.7 (22)申请日 2022.06.22 (71)申请人 西南大学 地址 400716 重庆市北碚区天生路2号 (72)发明人 董战旗　潘敏慧　伍芩　陈鹏　 鲁成　 (74)专利代理 机构 成都东唐智 宏专利代理事务 所(普通合伙) 51261 专利代理师 晏辉 (51)Int.Cl. C12N 15/30(2006.01) C12N 15/113(2010.01) C12N 15/10(2006.01) C12Q 1/6893(2018.01) C12N 15/11(2006.01)C12N 15/54(2006.01) (54)发明名称 家蚕微孢子虫NbNT T2及其应用 (57)摘要 本发明涉及生物 技术领域， 涉及家蚕微孢子 虫NbNTT2技术， 具体为家 蚕微孢子虫NbNTT2及其 应用， 提供一种家蚕微孢子虫NbNTT2， 所述 NbNTT2的核酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 干涉其 表达的核酸序列如SEQID  NO.2、 SEQ  ID No.3和 SEQ ID No.4所示中的任一条； 本发明提供了一 种家蚕微孢子虫NbNTT2及其应用， 其中NbNTT2能 够促进细胞内ATP的产生， 并且NbNTT2对微孢子 虫的增殖有 促进作用， 干 涉或抑制NbNTT2对微孢 子虫的增殖有抑制作用， 可以用于微孢子增殖药 物研发和微孢子防控。 权利要求书1页 说明书7页 序列表9页 附图6页 CN 114958874 A 2022.08.30 CN 114958874 A 1.家蚕微孢子虫NbNTT2， 其特征在于， 所述NbNTT2的核酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 干 涉其表达的核酸序列如SEQ  ID NO.2、 SEQ  ID No.3和SEQ ID No.4所示中的任一条。 2.根据权利 要求1所述的家蚕微孢子虫NbNTT2， 其特征在于， 所述NbNTT2的突变体序列 如SEQ ID No.12、 SEQ ID No.13所示中的任一条。 3.权利要求1所述的家蚕微孢子虫NbNTT2的促进剂在制备促进微孢子虫增殖中的应 用， 其特征在于， 所述 NbNTT2的核酸序列为如SEQ  ID NO.1所示。 4.根据权利要求1所述的家蚕微孢子虫NbNTT2的抑制剂在制备抑制微孢子虫增殖中的 应用； 其特征在于， 所述NbNTT2的核 酸序列为如SEQ  ID NO.2或SEQ  ID No.3或SEQ  ID No.4 所示。 5.根据权利要求1所述的家蚕微孢子虫NbNTT2的抗体在孵育细胞中的应用， 其特征在 于， 所述NbNTT2的核酸序列为如SEQ  ID NO.1所示。 6.根据权利要求1所述的应用， 所述NbNTT2通过调节剂调控BmHXK靶基因调控宿主ATP 变化， 影响微孢子虫增殖， 所述BmHX K靶标基因的序列如SEQ  ID No.5所示。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述调节剂为dsNbNTT2， 所述dsNbNTT2为 SEQ ID No.6所示。 8.过表达 权利要求1所述家蚕微孢子虫的试剂在促进靶基因BmHX K表达中的应用。 9.过表达BmHX K靶基因的试剂在制备促进微孢子虫增殖的药物中的应用。 10.抑制BmHX K靶基因的试剂在制备抑制微孢子虫增殖的药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114958874 A 2家蚕微孢 子虫NbNT T2及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物技术领域， 涉及家蚕微孢子虫NbNTT2技术， 具体为家蚕微孢子虫 NbNTT2及其应用。 背景技术 [0002]微孢子虫(Microsporidia)是一类专性细胞内寄生真菌， 普遍存在 于自然界中， 可 以感染包括人类在内的原生生物、 无脊椎动物以及的脊椎动物。 微孢子虫感染会对特种 经 济动物(蚕、 蜂)和水产动物(虾、 鱼)等造成重大经济损失； 感染人类密切接触的动物或者感 染免疫力低下或缺陷的人群时， 也会加速患者死亡， 严重威胁人类生命健康。 微孢子虫具有 独特的生物学和生活史特征， 其线粒体结构的退化导致许多其他动物典型的能量代谢途径 缺失， 导致其在细胞内寄生所需的能量代谢途径高度 依赖于宿主细胞。 因此， 研究微孢子虫 自身增殖 的能量代谢机制及其对宿主能量代谢的调控机制可为微孢子虫防控和治疗提供 行之有效的策略。 [0003]微孢子虫在进化过程中能量代谢途径发生缩减和相关细胞器的进行了特化。 在进 化过程中期能量代谢工厂即线粒体也发生特化， 形成了两层膜结构的纺锤剩体， 同时丢失 了大部分能量代谢相关基因， 如脂肪酸合酶复合体以及三羧酸循环所需的关键基因等。 微 孢子虫能量代谢途径的减少使其产生的能量难以满足自身增殖的需求， 因此微孢子虫需在 宿主细胞中完成在微孢子虫适应宿主的过程中， 其增殖和发育要依赖于宿主的物质和 能 量， 以保证微孢子虫寄生宿主细胞时， 保障发育所需的底物或ATP充分供应。 微孢子虫的感 染过程中会调控宿主代谢途径以及相 应的代谢物变化为自身的发育和增殖提供足够的营 养和能量。 同时， 在其细胞膜上排列各种转运蛋白， 通过与宿主相互作用的代谢酶来调控宿 主能量代谢。 家蚕微粒子(Nosema  bombycis， N.bombycis)是第 一个被鉴定的微孢子虫， 是 微孢子虫的代表种， 由家蚕微粒子感染引起的家蚕微粒子病是蚕业生产上危害最严重的疫 病之一， 是目前唯一的法定检疫对象。 因此， 探究在家蚕微孢子虫ATP转运蛋白与宿主互作 过程中的重要功能， 既有助于完善病原与宿主相互作用理论， 也为微孢子虫病防控和抗微 孢子虫育种提供新方向、 新靶标。 发明内容 [0004]基于此， 本发明的目的之一在于提供一种家蚕微孢子虫ATP/ADP转运蛋白NbNTT2 在ATP转运和产生中的应用； 本发明的目的之二在于提供所述家蚕微孢子虫NbNTT2在制备 抑制微孢子虫增殖中的应用； 本发明的目的之三在于提供过表达所述家蚕微孢子虫NbNTT2 靶向调控基因BmHX K在制备抑制微孢子虫增殖的药物中的应用。 [0005]为了达到上述目的， 本申请实施例采用的技 术方案如下： [0006]第一方面， 提供一种家蚕微孢子虫NbNTT2， 所述NbNTT2的核酸序列如SEQ  ID NO.1 所示， 干涉其表达的核酸序列如SEQ  ID NO.2、 SEQ  ID No.3和SEQ  ID No.4所示中的任一 条。说　明　书 1/7 页 3 CN 114958874 A 3