(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210723791.5 (22)申请日 2022.06.23 (71)申请人 新疆农业大 学 地址 830052 新疆维吾尔自治区乌鲁 木齐 市沙依巴克区南昌路42号 (72)发明人 刘武军　刘玲玲　方超　曹行　 马海玉　陈斌　何海迎　 (74)专利代理 机构 西安鼎迈知识产权代理事务 所(普通合伙) 6126 3 专利代理师 刘喜保 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 含有ADCY8基因用于筛选新疆驴泌乳性状的 试剂盒及其应用 (57)摘要 本发明公开了含有ADCY8基因用于筛选新疆 驴泌乳性状的试剂盒及其应用， 通过选用新疆驴 ADCY8基因特定SNP位点作为 分子标记物， 匹配 特 异性引物及相适应的扩增体系， 制备获得用于筛 选新疆驴泌乳性状的试剂盒， 通过检测能够准确 筛选获得产奶量、 以及驴乳中乳脂率和蛋白率相 对较高的个体， 根据相对应的基因型进行新疆驴 优良产奶形状个体的选育， 加快新疆驴专门化乳 用品种的培育， 在为选育泌乳性状优良的新疆驴 品种， 提供分子辅助育种的理论基础和技术支持 的同时， 对于保护新疆驴的优良品种资源、 提高 农牧民经济收入、 加快新 疆驴发展具有实际应用 价值。 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 CN 114934122 A 2022.08.23 CN 114934122 A 1.用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒， 其特征在于， 所述用于检测ADCY8基因的SNP位 点为g.48366302。 2.如权利要求1所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒， 其特征在于， ADCY8基因的 SNP位点g.48366302等位基型因包括C C、 CT和TT。 3.如权利要求1所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂 盒， 其特征在于， 所述的试剂 盒 通过以下共建体系建成获得： (1)根据新疆驴ADC Y8基因的SNP位 点g.48366302， 自行人工设计特异性引物； (2)PCR反应试剂： 2 ×KASP Mix、 上下游引物、 DNA模板和水。 4.如权利要求2所述用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂 盒， 其特征在于， 所述的特异性引 物序列如下 所示： 上游引物1： 5' ‑GAAGGTCGGAGTCAACGGATTTTCCAAACTTTATCACTTCTACTTTGT‑3'； 上游引物 2： 5'‑GAAGGTGACCAAGTTCATGCTTCCAAACTTTATCACTTCTACTTTGC‑3'； 下游引物1： 5' ‑AGTCAACATCATTCTCAAGTTCTAGC‑3'。 5.如权利要求1所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂 盒的应用， 其特征在于， 所述试 剂盒的应用中， 通过检测方法体现， 具体包括如下步骤： (1)利用装有枸橼酸钠抗凝剂的采血管， 活体采集新疆驴颈静脉血5ml， ‑20℃保存； 提 取基因组DNA，‑20℃保存待用； (2)采用步骤(1)总共提取获得的新疆驴基因组DNA进行， ADCY8基因PCR扩增， 根据设计 的引物， 利用权利要求 1或2任意一项提供的试剂盒特异性扩增ADCY8基因； PCR反应体系为， 2×KASP Mix 5 μL， 100 μM上游引物10.015 μL， 100 μM 上游引物20.015 μL， 100 μM 下游引物 0.04 μL上下游引物各0.07μL， 基因组DNA  2 μL， ddH2O补充至10 μL； 反应条件为， 94℃起始步骤， 1 个循环10mi n； 94℃10个 循环20s； 61℃45s； 94℃3 5个循环20s； 55℃20s； (3)基于步骤(2)中扩增获得的产物进行KASP 分型： 基于引物末端碱基的特异匹配来对 SNP分型， 利用Douglas平台， 对SNP进行双等 位基因判断， 从而 进行基因分型。 6.如权利要求2或5任意一项所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒在产奶量高的 新疆驴的选 育中的应用。 7.如权利要求2或5任意一项所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒在乳脂率和蛋 白率相对较高的新疆驴的选 育中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114934122 A 2含有ADCY8基因用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒及其应用 技术领域 [0001]发明涉及动 物遗传选育的鉴定方法， 具体的， 本 发明涉及含有ADCY8基因用于筛选 新疆驴泌乳性状的试剂盒及其应用的技 术领域。 背景技术 [0002]驴奶富含功能性乳清蛋白与不饱和脂肪酸。 具有延寿， 增强抵强力和免疫力， 保肝 护胃， 美白肌肤等独特功能作用。 驴乳所有功效皆为天然的。 驴奶是最接近人乳的奶中珍 品， 对人体的心、 胃、 脾、 肺、 肝、 前列腺等多种器官有保健作用， 其营养成分比例接近人乳的 99％。 近年来随着社会经济的发展和人们生活水平的提高， 国民饮食结构发生了很大 的变 化， 在营养保健方面的要求也越来越高。 在乳制品领域， 人们不只满足于牛、 羊奶， 对奶的功 能性有了更多的要求， 因此， 人们对营养丰富的驴奶需求也越来越大， 驴产业有着不可限量 的市场前 景。 [0003]据悉， 驴只有在哺乳期才产奶， 每天能采一斤左右， 母驴采奶的黄金期是三个月， 一头驴能采 六七年。 生产1公 斤驴奶粉需要12 ‑15公斤鲜驴奶， 并且每头驴每天只产1 ‑2公斤 鲜驴奶， 一头可产奶的驴一年可产 250‑350千克奶， 其中只有100干克的奶可用干加工销售， 其余的奶用干喂养小驴， 而产出的鲜驴奶， 几乎全部被用于加工成驴奶和驴奶粉， 所以可以 说产销率达到100％。 而且随着农业机械化程度的提高， 现在毛驴的存栏量以每年30％的速 度在减少， 驴奶已经成为了资源 稀缺性滋补品。 [0004]中国是世界上养驴最多的国家之一， 驴种资源丰富， 有近30个驴品种。 近年来随着 社会经济的发展和人们生活水平的提高， 国民饮食结构发生了很大 的变化， 人们不只满足 于吃牛、 羊、 猪、 鸡等肉食品， 对传统的驴肉及其副产品也特别感兴趣。 驴的用途正在由役用 向肉用、 药用、 乳用等多用途转变。 [0005]我国驴奶产业目前处在产业化发展的初期， 产业基础较为薄弱。 受区域市场因素 影响， 东西部地区驴奶 价格差异较大。 [0006]但是， 目前未有乳用驴的专门化品种， 且生产用母驴的个体乳产量较低， 远低于牛 奶产量， 甚至低于驴奶产量， 无法满足人们对驴奶的乳制品的需要。 新疆驴是一种 具有肉、 皮、 药、 乳、 役等多种 经济用途的畜种。 选育具有高产奶性能的乳用驴既可弥补驴奶的市场 空缺， 又可显著提升新疆驴的饲用价 值及经济价 值， 是促进驴产业发展的重要工作。 发明内容 [0007]针对现有技术中未见报道对于新疆驴泌乳性状选育有效的分子标记以及未见专 门针对AD CY8基因在新 疆驴泌乳性状筛选中的SNP标记研究的技术现状， 本发 明旨在提供了 含ADCY8基因用于提高新 疆驴泌乳性状的检测试剂盒， 利用新 疆驴血液样本作为测试材料， 利用本发明检测试剂盒通过检测， 用于选育提高新疆驴泌乳性状为提高驴产奶量的选育 中， 期望选择与产奶 性状密切相关的DNA标记， 从而加快育种进程。 [0008]本发明提供用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒， 所述试剂盒中含有用于检测说　明　书 1/6 页 3 CN 114934122 A 3