(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210600794.X (22)申请日 2022.05.30 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO.40124 202 2.04.06 CGMCC NO.40125 202 2.04.06 (71)申请人 中华全国供销合作总社昆明食用菌 研究所 地址 650032 云南省昆明市政教路14 号 (72)发明人 李雪松　华蓉　孙达锋　刘绍雄　 张俊波　岳万松　李建英　余金凤　 刘春丽　 (74)专利代理 机构 昆明知道 专利事务所(特殊 普通合伙企业) 5 3116 专利代理师 邓菁菁　姜开侠(51)Int.Cl. C12N 1/14(2006.01) C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12Q 1/04(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (54)发明名称 两株金耳新菌株及其SSR分子标记鉴定方法 (57)摘要 本发明公开了两株金耳新菌株及其SSR分子 标记鉴定方法， 所述2个菌株命名为ZJJE002和 ZJJE003， 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员 会普通微生物中心； 保藏编号为CGMCC  NO.40124 与CGMCC NO.40125， ITS序列如SEQ  NO.1和SEQ   NO.2所示。 所述SSR分子标记鉴定金耳ZJJE002和 ZJJE003菌株的方法是通过检测金耳菌种的SSR 分子标记组合PCR扩增产物的等位片段的数量及 分子量大小， 获得不同SSR等位片段的编号组合， 符合SSR等位片段编号组合为1/1/2/1/3/1/2的 菌株为金耳ZJJE002 菌株； 符合SSR等位片段编号 组合为3/1/2/1/3/2/2的菌株为金耳ZJJE003菌 株。 本发明SSR分子标记鉴定方法具有节约成本、 效率高、 操作方便、 结果准确的优点， 可用于 ZJJE002与ZJJE003菌株的快速鉴定 。 权利要求书2页 说明书7页 序列表1页 附图9页 CN 115261236 A 2022.11.01 CN 115261236 A 1.两株金耳新菌株ZJJE002与ZJJE003， 其特征在于， 保藏于中国微生物菌种保藏管理 委员会普通微生物中心， 保藏编号分别为CGMCC  NO.40124与CGMCC  NO.40125， ITS序列分别 如SEQ NO.1和SEQ  NO.2所示。 2.金耳SSR分子标记组合， 其特征在于由以下7对SSR分子标记组成： JESSR003、 JESSR010、 JES SR032、 JESSR075、 JES SR090、 JES SR098及JES SR100； 所述SSR分子标记的引物序列分别为： JESSR003‑F： CATCCCTATGCAATGATTCCACG； JESSR003‑R： TAGAACAAGACTAGA ACCGGGAC； JESSR010‑F： GAAGGACGTACA AGGCCGTG； JESSR010‑R： GTGACTAGAT TTGATGCTG GCAG； JESSR032‑F： GCTCTGT TTACGAGGGGATAGG； JESSR032‑R： CCGAATCTGACAC CATCATCTCT； JESSR075‑F： GAGTCT TGAGCGGAGGAGTAC； JESSR075‑R： GACGTAC CATGCTGATGCTGAT； JESSR090‑F： TAAAGCACTTCAATTGCGTCTCG； JESSR090‑R： CTAGAG GAGGCCAAGAGGAAGAA； JESSR098‑F： CCTATACCTTAGCCTGAGACAGC； JESSR098‑R： GAGGATCACCATGTCCGTCTC； JESSR100‑F： CTTGGGGAGGTGGAGAGTATAG G； JESSR100‑R： ACTGTTCTTCGCTTGACCAAATT。 3.根据权利 要求2所述金耳SSR分子标记组合， 其特征在于， 所述7对  SSR分子标记的引 物的等位片段数量及分子量大小信息如下：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115261236 A 2。 4.一种采用权利要求2所述SSR分子标记鉴定金耳菌株ZJJE002与ZJJE003的方法， 其特 征在于， 按以下步骤实现： S1、 将金耳菌种转接 到马铃薯 葡萄糖琼脂固体培 养基上， 25℃培 养15d后收集菌 丝； S2、 提取所述菌丝的基因 组DNA， 紫外分光 光度法检测总基因 组DNA浓度和质量； S3、 采用权利要求2的S SR分子标记对步骤2提取的DNA进行S SR标记的PCR扩增； S4、 将S3得到的扩增产物进行毛细管电泳检测， 分析S SR引物扩增 出的等位片段的数量及分子量大小， 获得不同SSR等位片段的编号组合， 符合SSR等位 片段编号组合的菌株即为金 耳ZJJE002 与ZJJE003菌株。 5.根据权利要求2所述方法， 其特征在于， 符合SSR等位片段编号组合为1/1/2/1/3/1/2 的菌株为金耳ZJJE002菌株； 符合SSR等位片段编号组合为3/1/2/1/3/2/2的菌株为金耳 ZJJE003菌株。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115261236 A 3