(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210655356.3 (22)申请日 2022.06.10 (71)申请人 甘肃农业大 学 地址 730070 甘肃省兰州市安宁区营门村1 号 (72)发明人 张小雪　李发弟　王维民　赵利明　 张德印　李晓龙　赵源　张煜坤　 许丹　程江博　王江荟　李文馨　 林长春　 (74)专利代理 机构 北京智为时代知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11498 专利代理师 王加岭　杨静 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 与绵羊生长性状相关的分子标记、 其检测方 法及应用 (57)摘要 本发明提供了一种与绵羊生长性状相关的 分子标记、 其检测方法及应用。 本发明通过对绵 羊ALB基因进行PCR扩增和序列分析， 发现在扩增 片段的第558位存在一个A /T多态性位点， 进 一步 使用KASPar引物对1271只绵羊的多态性位点进 行检测和建立最小二乘模型， 对基因型与生长性 状进行关联分析， 最终确定了本发明扩增的ALB 基因片段可以作为与绵羊平均日增重相关的分 子标记。 本发明通过检测分子标记， 可用于选留 基因为TT纯合型绵羊进入核心 群作为种羊， 以改 善绵羊的生长性状， 有助于增 加经济效益。 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 附图2页 CN 115181804 A 2022.10.14 CN 115181804 A 1.一种与绵羊生长性状相关的分子标记， 其特征在于， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所 示， 其中第5 58bp处的W表示A或T， 该突变导 致分子标记的A/T 多态性。 2.一种检测权利要求1所述的分子标记的PCR引物对， 其特征在于， 其包括核苷酸序列 如SEQ ID NO.2和SEQ  ID NO.3所示序列。 3.一种检测权利 要求1所述的分子标记的KASPar引物对， 其特征在于， 所述KASPar引物 对包括核苷酸序列如SEQ  ID NO.4所示的正向引物1， 如SEQ  ID NO.5所示的正向引物2和如 SEQ ID NO.6所示的通用反向引物C 。 4.一种检测权利要求1所述的分子标记的试剂 盒， 其特征在于， 其包含权利要求2的PCR 引物对或权利要求3所述的KAS Par引物对。 5.一种检测权利要求1所述的分子标记的方法， 其包括如下步骤： a)使用权利要求2的PCR引物对或权利要求3所述的KASPar引物对， 或者使用权利要求4 所述的试剂盒， 对绵羊基因 组DNA进行扩增； b)对步骤a)获得扩增产物的多态性 位点进行分型鉴定 。 6.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于， 步骤b)中的分型鉴定方法为测序法、 荧光 探针法、 基因芯片法或高分辨 率溶解曲线法。 7.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于， 利用权利要求3所述的KASPar引物对进行 PCR扩增， 扩增结束后， 再通过检测荧 光信号确定分型 结果。 8.权利要求1所述的分子标记及其多态性位点、 或权利要求2或3所述的引物对， 或权利 要求4所述的试剂盒， 或权利要求5 ‑7任一项所述的方法在绵羊生长性状 检测中的应用。 9.权利要求1所述的分子标记及其多态性位点、 或权利要求2或3所述的引物对， 或权利 要求4所述的试剂盒， 或权利要求5 ‑7任一项所述的方法在绵羊育种中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特 征在于， 其育种目的是为挑选出 快速生长型绵羊。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115181804 A 2与绵羊生长性状相关的分子标记、 其检测方 法及应用 技术领域 [0001]本发明属于分子标记的技术领域， 具体涉及ALB基因片段作为影响绵羊生长性状 的分子标记、 其检测方法及应用。 背景技术 [0002]白蛋白(ALB)是最丰富 的循环蛋白， 该蛋白对多种内源性分子(包括脂肪酸、 激素 和代谢物)起着载体蛋白的作用。 在人类中， 一些研究表明， A LB水平与体脂百分比呈负相关 (Chang， Xu， Ferrante， &Krakoff， 2 019)， 妊娠晚期 母体血清ALB比率降低将影响孕妇的婴儿 出生体重， 并且存在正相关(Wada  et al.， 2021)。 此外， 有一份报告表明， 鸭ALB基因与 FCR 和RFI呈强负相关。 但是ALB与绵羊的生长性状是否相关， 或有什么关联并不清楚。 [0003]绵羊产业是现代畜牧业的重要组成部分， 可以为毛纺产业生产原料， 提高人民的 经济收入。 随着人们生活水平的普遍提高， 羊肉因其低胆固醇、 瘦肉、 高营养、 嫩滑而广受欢 迎(Hehua et al.， 2020)。 [0004]本发明通过对ALB基因进行测序和分析， 探讨其不同基因型与绵羊生长性状 的关 联性， 旨在为 提高绵羊生长性状的遗传改良方面 提供基因素 材， 加速优质肉羊的培 育进程。 发明内容 [0005]为了解决上述技术问题， 本发明提供一种作为与绵羊生长性状相关的分子标记及 其应用。 本发明的分子标记是从绵羊ALB基因中扩增得到， 其具体核苷酸序列如SEQ  ID  NO.1所示。 通过扩增绵羊ALB基因的DNA序列并测序， 寻找ALB基因的多态性位点， 分析不同 的基因型与绵羊生长性状相关性， 并建立含多态性位点的分子标记的检测方法， 并可将该 分子标记应用于新型优质肉羊新品种的培 育中。 [0006]为实现上述目的， 本发明采用以下的技 术方案为： [0007]一种与绵羊生长性状相关的分子标记， 该分子标记的核苷酸序列如SEQ  ID NO.1 所示， 其中第558bp位的W表示A或T， 由于上述序列在第558位碱基处有一个A/T突变， 从而导 致了绵羊ALB基因在该位 点的A/T多态性。 [0008]基因型与性状关联分析的结果显示， 随着测定周期的延长， ALB  g.8699A>T突变位 点与绵羊平均日增重(ADG)显著相关。 携带TT基因型羊的80 ‑100、 80‑140、 80‑160平均日增 重要优于携带TA或A A基因型的羊(P< 0.05)， 由此可知TT为优势基因型。 [0009]一种检测上述分子标记的引 物对， 优选地， 所述检测上述分子标记的引 物对包括 核苷酸序列如SEQ  ID NO.2和SEQ  ID NO.3所示序列。 [0010]一种检测上述分子标记的KASPar引物对， 所述KASPar引物对包括核苷酸序列如 SEQ ID NO.4所示的正向引物1， 如SEQ  ID NO.5所示的正向引物2和如SEQ  ID NO.6所示的 通用反向引物C 。 [0011]一种检测上述分子标记的试剂盒， 所述试剂盒中包含了检测上述分子标记的PCR 引物对或KAS Par引物对。说　明　书 1/5 页 3 CN 115181804 A 3