(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210666529.1 (22)申请日 2022.06.13 (66)本国优先权数据 202210347234.8 202 2.04.01 CN (71)申请人 河南农业大 学 地址 450002 河南省郑州市文化路95号 (72)发明人 丁俊强　田志强　李志敏　胡明建　 郝俊杰　邓策　吕蒙　杜文杰　 李政　 (74)专利代理 机构 北京汇智胜知识产权代理事 务所(普通 合伙) 11346 专利代理师 孙华 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 与玉米大斑病抗病位点紧密连锁的分子标 记及其应用 (57)摘要 本发明公开了与玉米大斑病抗病位点紧密 连锁的分子标记， 所述分子标记包括SSR分子标 记SSRNLB5 ‑3， 扩增该分子 标记SSRNLB5 ‑3的一对 引物序列如SEQ  ID NO:1和2所示； 还包括SSR分 子标记SSRNLB5 ‑5， 扩增该分子 标记SSRNLB5 ‑5的 一对引物序列如SEQ  ID NO:3和4所示； 还包括 SSR分子标记SSRNLB5 ‑6， 扩增该分子标记 SSRNLB5‑6的一对引物序列如SEQ  ID NO:5和6所 示； 还包括SSR分子标记SSRNLB5 ‑8， 扩增该分子 标记SSRNLB5 ‑8的一对引物序列如SEQ  ID NO:7 和8所示。 本发明还公开了该分子标记在玉米大 斑病抗病位点定位和玉米遗传育种中的应用。 以 及利用该分子标记选育抗大斑病的玉米自交系 的方法。 本发明用于培育玉米大斑病抗性株系， 拓宽玉米抗病资源种质研究的方法， 对于玉米抗 病机制的理论研究具有极大地指导 意义。 权利要求书1页 说明书6页 附图4页 CN 115058534 A 2022.09.16 CN 115058534 A 1.与玉米大斑病抗病位点紧密连锁的分子标记， 所述分子标记包括SSR分子标记 SSRNLB5‑3， 扩增该分子标记S SRNLB5‑3的一对引物序列如SEQ  ID NO:1和2所示。 2.如权利要求1所述的与玉米大斑病抗病位点紧密连锁的分子标记， 其特征在于， 所述 分子标记还包括SSR分子标记SSRNLB5 ‑5， 扩增该分子标记SSRNLB5 ‑5的一对引物序列如SEQ   ID NO:3和4所示。 3.如权利要求1所述的与玉米大斑病抗病位点紧密连锁的分子标记， 其特征在于， 所述 分子标记还包括SSR分子标记SSRNLB5 ‑6， 扩增该分子标记SSRNLB5 ‑6的一对引物序列如SEQ   ID NO:5和6所示。 4.如权利要求1所述的与玉米大斑病抗病位点紧密连锁的分子标记， 其特征在于， 所述 分子标记还包括SSR分子标记SSRNLB5 ‑8， 扩增该分子标记SSRNLB5 ‑8的一对引物序列如SEQ   ID NO:7和8所示。 5.权利要求1 ‑4任一项所述的分子标记， 其特征在于， 所述玉米大斑病抗病位点为 qZCLB5， 位于玉米第5号染色体20 5.0Mb～215.4Mb区间。 6.一种如权利要求1 ‑4任一项所述的分子标记在玉米大斑病分子标记辅助育种中的用 途。 7.一种利用如权利要求1 ‑4任一项所述的分子标记选育抗大斑病的玉米自交系的方 法， 其特征是： 以抗大斑病和感大斑病的玉米自交系及其中间育种材料构建分离群体， 利用 与玉米大斑病抗病位点紧密连锁的分子标记SSRNLB5 ‑3， 和/或SSRNLB5 ‑5， 和/或SSRNLB5 ‑ 6， 和/或SSRNLB5 ‑8进行辅助选择， 挑选带有抗病位点qZCLB5的植株进行回交和自交， 通过 数代选择， 获得高抗大斑病的玉米优良自交系。 8.如权利要求1 ‑4任一项所述的分子标记的应用， 其特征在于， 所述分子标记用于玉米 大斑病抗病位 点的定位。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115058534 A 2与玉米大斑病抗病位点紧密连锁的分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及一种与玉米大斑病抗病位 点紧密连锁的分子标记及其应用。 背景技术 [0002]玉米大斑病是由大斑刚毛球腔菌Setosp haeria turcica引起的一种叶部病害。 在 自然条件 下苗期很少发病， 玉米抽雄后发病逐渐加重， 严重时不仅可以危害玉米的叶片， 还 可以侵染玉米的叶鞘和苞叶， 影响玉米的产量和品质。 在玉米生产上， 抗病品种的推广和使 用是有效控制玉米大斑病最经济有效的途径。 然而， 近年来， 随着 耕作制度的改变和病原菌 小种的变异 等因素的影响， 玉米大斑病在我国又有回升 之势， 尤其在东北、 华北北部等我国 玉米主产区和西南高海拔地区冷凉山区较为严重， 感病品种一般减产20％左右， 严重时可 减产50％以上。 [0003]解析抗病遗传规律是进行抗病育种的基础。 自上世纪60年代以来， 国内外多个课 题组开展了对玉米大斑病的抗病遗传基础研究， 并鉴定出多个抗病基因位点。 玉米大斑病 抗性是非常 复杂的形状， 挖掘和利用在多环境下表现抗性稳定的抗病位点对选育抗病品种 非常重要。 近年来， 含有热带亚热带血缘的材料在抗病性改良上日益受到育种工作者的重 视， 解析其抗玉米大斑病的遗传机理， 鉴定玉米大斑病稳定的抗病位点， 促进 大斑病抗性的 分子标记辅助改良在育种实 践中的有效运用， 是目前玉米育种亟 待解决的问题。 发明内容 [0004]本发明的一个目的是解决至少 上述问题和/或缺陷， 并提供至少后面将说明的优 点。 [0005]本发明还有一个目的是提供一种与玉米大斑病抗病位 点紧密连锁的分子标记。 [0006]本发明提供的技 术方案为： [0007]与玉米大斑病抗病位点紧密连锁的分子标记， 所述分子标记包括SSR分子标记 SSRNLB5‑3， 扩增该分子标记S SRNLB5‑3的一对引物序列如SEQ  ID NO:1和2所示。 [0008]优选的是， 所述分子标记还包括SSR分子标记SSRNLB5 ‑5， 扩增该分子标记 SSRNLB5‑5的一对引物序列如SEQ  ID NO:3和4所示。 [0009]优选的是， 所述分子标记还包括SSR分子标记SSRNLB5 ‑6， 扩增该分子标记 SSRNLB5‑6的一对引物序列如SEQ  ID NO:5和6所示。 [0010]优选的是， 所述分子标记还包括SSR分子标记SSRNLB5 ‑8， 扩增该分子标记 SSRNLB5‑8的一对引物序列如SEQ  ID NO:7和8所示。 [0011]优选的是， 所述玉米大斑病抗病位点为qZCLB5， 位于玉米第5号染色体205.0Mb～ 215.4Mb区间。 [0012]本发明还提供了一种所述的分子标记在玉米大斑病分子标记辅助育种中的用途。 [0013]本发明还提供了所述分子标记选育抗大斑病 的玉米自交系的方法， 包括以下步 骤： 以抗大斑病和感大斑病的玉米 自交系及其中间育种 材料构建分离群体， 利用与玉米大说　明　书 1/6 页 3 CN 115058534 A 3