(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210580765.1 (22)申请日 2022.05.25 (71)申请人 中国农业科 学院油料作物研究所 地址 430000 湖北省武汉市武昌区徐 东二 路2号 (72)发明人 王汉中　任丽军　顿小玲　王新发　 詹杰鹏　刘贵华　 (74)专利代理 机构 武汉宇晨专利事务所(普通 合伙) 42001 专利代理师 龚莹莹 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6837(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01)G16B 20/30(2019.01) G16B 25/20(2019.01) G16B 40/00(2019.01) (54)发明名称 与油菜甲基硒代半胱氨 酸含量性状QTL紧密 连锁的分子标记及其应用 (57)摘要 本发明属于分子生物学及遗传育种技术领 域， 公开了与油菜甲基硒代半胱氨酸含量性状 QTL紧密连锁的分子标记及其应用。 本发明获得 了一个与油菜甲基硒代半胱氨酸含量显著关联 的SNP标记， 位于Darmor ‑bzh v10基因组A08染色 体上第18847721位碱基位置， 可解释8.3%的表型 变异。 通过该分子标记进行辅助选择， 可 以提高 含较高甲基硒代半胱氨酸油菜单株的筛 选效率。 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 CN 114990251 A 2022.09.02 CN 114990251 A 1.检测甘蓝型油菜Darmor ‑bzh v10基因组A08染色体上第18847721位碱基SNP的试剂 在油菜甲基硒代半胱氨酸含量筛 选育种中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 所述的试剂为引物。 3.根 据 权 利 要 求 2 所 述 的 应 用 ，所 述 的 引 物 为 B n M e S 4 0 ‑8 A 1‑F 1 ： ATATGAGAAACAATTTCTATTATCTTTCA， BnMeS40 ‑8A1‑F2： TATGAGAAACAATTTCTATTATCTTTCC， BnMeS40‑8A1‑R： AGAGTGTCTAGATA ATTTAAATAAAGAAAAA。 4.检测包含有甘蓝型油菜Darmor ‑bzh v10基因组A08染色体上第18847721位碱基的油 菜序列的试剂在油菜甲基硒代半胱氨酸含量筛选育种中的应用， 所述的序列为SEQ  ID  NO.2所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114990251 A 2与油菜甲 基硒代半胱氨酸含量性状Q TL紧密连锁的分子标记 及其应用 技术领域 [0001]本发明属于分子生物学及遗传育种技术领域， 具体涉及与油菜甲基硒代 半胱氨酸 含量性状QTL紧密连锁的分子标记及其应用。 背景技术 [0002]现代研究表明， 不 同形态的硒在生理功能及生物安全性等方面存在较大差异。 其 中无机硒的生物利用率低且毒副风险大； 与无机硒相比， 甲基硒代半胱氨酸具有更高的人 体吸收效率、 生理 活性及生物安全性， 因此成为营养学家推荐的健康补硒形式。 [0003]植物是硒元素由环境进入人类食物链的主要途径， 也是将环境中的无机硒转化为 甲基硒代半胱氨酸等有机硒形态的重要载体。 甘蓝型油菜是我国主推的栽培油菜类型， 不 仅普遍具有较优异的硒富集能力， 其菜苗及菜薹还因口味好、 营养均衡、 易加工等优点， 近 年来已逐渐成为广 受消费者喜爱的蔬菜产品。 有研究发现， 不同油菜品种的硒形态构成及 含量差异较大， 有机硒转化相关性状遗传变异丰富。 由此可见， 油菜 是植物源有机硒转化的 良好载体。 深入挖掘油菜特异种质中有机硒高效合成的遗传调控位点进行育种改良， 将有 助于缓解我国日益增长的健康补硒需求。 [0004]传统的育种手段由于育种年限长、 选择效率低， 难以满足当前作物育种需求。 随着 分子生物学和测序技术的快速发展， 通过基因型选择加速育种进程已成品种选育中广泛应 用的技术手段。 利用分子标记辅助选择检测油菜中与甲基硒代半胱氨酸高效合成性状紧密 关联的分子标记， 可以克服不同形态硒含量表型鉴定中的困难， 指导性状的精准导入或聚 合， 将极大提高育种效率。 目前， 植物甲基硒代半胱氨酸转化效率相关研究尚无报道， 而油 菜中尚无相关的遗传调控位 点被鉴定的报道。 [0005]本发明以油菜核心种质资源群体为材料， 利用全基 因组关联分析鉴定油菜中具有 育种应用潜力的甲基硒代半胱氨酸高效合成QTL位点， 并基于QTL位点信息开发分子标记， 将有助于提高 高甲基硒代半胱氨酸油菜品种育种效率。 发明内容 [0006]本发明的目的是在 于提供了检测甘蓝型油菜Darmor ‑bzh v10基因组第A08染色体 上第18847721位碱基的试剂在甘蓝型油菜甲基硒代半胱氨 酸含量筛选育种中的应用。 通过 对甘蓝型油菜Darmor ‑bzh v10基因组第A08染色体上第18847721位碱基的检测， 可实现甲 基硒代半胱氨酸油菜品种育种筛 选。 [0007]为了达到上述目的， 本发明采取以下技 术措施： [0008]与油菜甲基硒代半胱氨酸高效合成性状QTL 位点qBnMeS40 ‑8A1的获得： [0009](1)收集327份来自世界各个国家的甘蓝型油菜自交系作为油菜关联群体， 采集关 联群体各株系的单株叶片， 用CTAB法提取总DNA， 利用武汉双绿源创芯科技研究院有限公司 开发的油菜5 0K Illumina SNP芯片对每 个样本进行基因型分析。说　明　书 1/5 页 3 CN 114990251 A 3