(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210722639.5 (22)申请日 2022.06.24 (71)申请人 华中农业大 学 地址 430070 湖北省武汉市洪山区狮子山 街1号 申请人 赣南师范大学 (72)发明人 葛贤宏　陈道宗　金庆东　刘镒　 徐林珊　王晶　李再云　 (74)专利代理 机构 武汉智嘉联合知识产权代理 事务所(普通 合伙) 42231 专利代理师 姜婷 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/686(2018.01) (54)发明名称 与油菜橘红色花性状紧密相关的基因、 分子 标记及其应用 (57)摘要 本发明公开了与油菜橘红色花性状紧密相 关的基因、 分子标记及其应用， 橘红花油菜中 BnaA07.PAP2基因如SEQ  ID NO:1所示， 基于该基 因开发了与油菜橘红色花性状紧密相关的分子 标记， 且该分子 标记的序列如SEQ  ID NO:2～3所 示。 该分子标记可直接应用于油菜花色的选育过 程中， 加快选育创制不同遗传 背景的油菜花色新 品种。 权利要求书1页 说明书6页 序列表6页 附图2页 CN 114875171 A 2022.08.09 CN 114875171 A 1.橘红花油菜中BnaA07.PAP2基因在调控油菜花色中的应用， 其特征在于： 所述 BnaA07.PAP2基因的核苷酸序列如SEQ  ID NO:1所示。 2.一种与油菜橘红色花性状紧密相关的分子标记， 其特征在于： 所述分子标记包括序 列如SEQ ID NO:2所示的正向引物和序列如SEQ  ID NO:3所示的反向引物。 3.如权利要求2所述分子标记在鉴定油菜花色中的应用。 4.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于： 以待鉴定油菜单株总DNA为模板， 采用权利 要求2所述分子标记进行PCR扩增， 对 扩增产物检测。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于： 所述PCR扩增的体系共计12μL， 包括DNA   2.0 μL、 2×Mix5.0 μL、 正向引物和反向引物各0.5 μL、 余 量ddH2O。 6.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于： 所述PCR扩增的程序为： 94℃预变性3min； 94℃变性3 0sec， 57℃复性3 0sec， 68℃延伸2mi n， 共35个循环； 68℃延伸10mi n。 7.根据权利 要求4所述的应用， 其特征在于： 若仅获得393bp条带， 则待鉴定油菜单株为 纯合橘红花个 体。 8.根据权利要求 4所述的应用， 其特 征在于： 所述检测采用2％琼脂糖凝胶电泳检测。 9.如权利要求2所述分子标记在选 育创制不同油菜花色新品种中的应用。 10.一种包 含权利要求2所述分子标记的检测试剂盒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114875171 A 2与油菜橘红色花性状紧密相关的基因、 分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明属于油菜分子标记技术领域， 具体涉及一种与油菜橘红色花性状紧密相关 的基因、 分子标记， 及其在橘红花油菜的选 育、 油菜花色鉴定等方向的应用。 背景技术 [0002]花色是植物重要的性状之一， 具有吸引传粉者、 保护花器官、 维持花组织能量平衡 等功能。 目前橘红色、 粉红色、 紫色等彩花油菜已被育种家突破， 产量和品质与普通油菜相 当。 彩花油菜极大提升 了油菜的观赏 价值、 经济价 值和社会价 值。 [0003]彩花油菜为远缘杂交获得种质资源， 故急需一批可利用的分子标记进行早期辅助 选择， 以提高选择效率， 减少田间种植规模和后期鉴定工作， 缩短育种时间。 然而目前为止 还没有功能标记被 应用于橘红花油菜的选 育。 发明内容 [0004]为了解决现有技术中的问题， 本发明的目的在于提供一种与油菜橘红色花性状紧 密相关的基因、 分子标记， 以缩短橘红花油菜的选 育时间。 [0005]为了实现上述目的， 本发明的技 术方案具体如下： [0006]本发明首先利用白花甘蓝型油菜与橘红花甘蓝型油菜杂交并发展了F2群体， 对花 色性状进行候选基因的粗定位， 获得了能够调控油菜花色中BnaA07.PAP2基因， 其核苷 酸序 列在红花油菜中如SEQ  ID NO:1所示， 在白花油菜中如SEQ  ID NO:4所示。 [0007]基于BnaA07.PAP2基因中的一个与油菜花色共 分离的indel特异 标记， 进一步获得 了一个与油菜橘红色花性状紧密相关 的分子标记， 其包括序列如SEQ  ID NO:2所示的正向 引物和序列如SEQ  ID NO:3所示的反向引物。 [0008]上述分子标记可以用于鉴定油菜花色， 其鉴定方法为： 以待鉴定油菜单株总D NA为 模板， 采用如SEQ  ID NO:2～3所示的分子标记进行PCR扩增， 对扩增产物采用2 ％琼脂糖凝 胶电泳检测， 若仅获得393bp条 带， 则待鉴定油菜单株为纯合橘红花个 体。 [0009]进一步地， 在上述技术方案中， PCR扩增的体系共计12 μL， 其中包括DNA  2.0 μL、 2× Mix5.0 μL、 正向引物和反向引物各0.5 μL、 余 量ddH2O。 [0010]进一步地， 在上述技术方案中， PCR扩增的程序为： 94℃预变性3min； 94℃变性 30sec， 57℃复性3 0sec， 68℃延伸2mi n， 共35个循环； 68℃延伸10mi n。 [0011]上述分子标记还可以用于选育创制不同油菜花色新品种， 有利于进行早期辅助 选 择， 缩短育种时间。 [0012]本发明的有益效果为： 本发明发现了一个新的控制油菜橘红花性状的基因， 并开 发了特异分子标记， 可用于极早判断油菜植株花色表型， 加快选育创制不同遗传背景 的油 菜花色新品种。说　明　书 1/6 页 3 CN 114875171 A 3