(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210747201.2 (22)申请日 2022.06.28 (71)申请人 山东省农业科 学院畜牧兽医研究所 地址 250100 山东省济南市历城区工业北 路202号 申请人 新疆农业大 学　 新疆畜牧科 学院畜牧 研究所 (72)发明人 田可川　何军敏　黄锡霞　刘桂芬　 张果平　田月珍　付雪峰　魏晨　 毛静艺　 (74)专利代理 机构 济南智圆行方专利代理事务 所(普通合伙企业) 37231 专利代理师 张玉琳 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01)C12N 15/11(2006.01) C12N 5/077(2010.01) C12N 5/071(2010.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 17/00(2006.01) (54)发明名称 一种绵羊毛 囊发育标志 物miR-23b及其应用 (57)摘要 本发明提供了一种绵羊毛囊发育标志物 miR‑23b及其应用， 属于生物学技术领域。 本发明 收集苏博美利奴羊E65、 E85、 E105和E135胚胎日 的胚胎皮肤组织和D7和D30 出生后的羔 羊的皮肤 组织提取RNA进行测序筛选。 本发明发现随着胚 胎毛囊的发育miR ‑23b的表达量逐渐升高， 同时， 本发明发现通过调节miR ‑23b的表达 可以调节绵 羊真皮成纤维细胞的增殖和细胞中毛囊发育相 关基因的表达 。 权利要求书1页 说明书7页 序列表3页 附图4页 CN 114854882 A 2022.08.05 CN 114854882 A 1.检测miR ‑23b表达量的引物在制备检测苏博美利奴羊胚胎毛囊发育检测试剂盒中的 应用， 其特 征在于， 所述引物的序列如SEQ  ID NO.1所示。 2.根据权利 要求1所述的应用， 其特征在于， 所述miR ‑23b在毛囊发育初期表达量低， 所 述miR‑23b在毛囊发育后期表达量高。 3.miR‑23b抑制剂在制 备毛囊发育促进剂中的应用， 其特征在于， 所述miR ‑23b抑制剂 为miR‑23b inhibitor， 所述miR ‑23b inhibitor的序列如SEQ  ID NO.6。 4.miR‑23b抑制剂在制备绵 羊真皮成纤维细胞增殖促进剂中的应用， 其特征在于， 所述 miR‑23b抑制剂为miR ‑23b inhibitor， 所述miR ‑23b inhibitor的序列如SEQ  ID NO.6所 示。 5.miR‑23b抑制剂在制备绵羊真皮成纤维细胞中毛囊发育相关基因表达促进剂中的应 用， 其特征在于， 所述miR ‑23b抑制剂为miR ‑23b inhibitor， 所述miR ‑23b inhibitor的序 列如SEQ ID NO.6； 所述毛囊发育相关基因为： NOTC H1、 WNT10A和TGFβ 2； 所述基因表达促进剂为mRNA 表达促进剂和蛋白表达促进剂。 6.miR‑23b促进剂在制 备毛囊发育抑制剂中的应用， 其特征在于， 所述miR ‑23b促进剂 为miR‑23b mimic， 所述miR ‑23b mimic的序列如SEQ  ID NO.4和SEQ  ID NO.5所示。 7.miR‑23b促进剂在制备绵 羊真皮成纤维细胞增殖抑制剂中的应用， 其特征在于， 所述 miR‑23b促进剂为miR ‑23b mimic， 所述miR ‑23b mimic的序列如SEQ  ID NO.4和SEQ  ID  NO.5所示。 8.miR‑23b促进剂在制备绵羊真皮成纤维细胞中毛囊发育相关基因表达抑制 剂中的应 用， 其特征在于， 所述miR ‑23b促进剂为miR ‑23b mimic， 所述miR ‑23b mimic的序列如SEQ   ID NO.4和SEQ  ID NO.5所示； 所述毛囊发育相关基因为： NOTC H1、 WNT10A和TGFβ 2； 所述基因表达抑制剂为mRNA 表达抑制剂和蛋白表达抑制剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114854882 A 2一种绵羊毛囊发育标志物miR ‑23b及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物学技术领域， 尤其涉及一种绵羊毛囊发育标志物miR ‑23b及其应 用。 背景技术 [0002]苏博美利奴是中国自主培育的超细羊毛品种， 其平均羊毛纤维直径在17 ‑19  µm， 超过了80  Nm 的标准纺织品支数， 该品种对细毛羊产业影响深远。 羊毛的生长发育受毛囊 控制， 毛囊是附着在皮肤上的微小器官， 具有复杂的形态、 复杂的结构和周期性的生长模 式。 因此， 研究毛囊的发育的标志 物以及毛囊发育的机制将有助于羊毛产业的发展。 [0003]MicroRNA （miRNA） 是一类长度约为19 ‑25nt的内源性非编码RNA， 广泛参与基因转 录后调控活动， 具有高度序列保守性、 表达时序性和组织特异性。 研究表明miRNA参与各种 各样的调节途径， 包括 发育、 病毒防御、 造血过程、 脂肪代谢等， 具有重要的基因表达调控作 用。 目前， 关于Micr oRNA在毛囊发育中的功能尚不完全清楚， 因此本发明对Micr oRNA在毛囊 发育中的表达情况和功能进行研究。 发明内容 [0004]本发明的目的在 于提供一种和绵羊毛囊发育相关的标志物miR ‑23b并且探究miR ‑ 23b在毛囊发育中的功能。 [0005]为实现上述目的， 本发明提供了如下技 术方案： 本发明提供了检测miR ‑23b表达量的引物在制备检测苏博美利奴羊胚胎毛囊发育 检测试剂盒中的应用， 所述引物的序列如SEQ  ID NO.1所示。 [0006]优选地， 所述miR ‑23b在毛囊发育初期表达量低， 所述miR ‑23b在毛囊发育后期表 达量高。 [0007]优选地， 所述miR ‑23b抑制剂为mi R‑23b inhibitor， 所述mi R‑23b inhibitor的序 列如SEQ ID NO.6。 [0008]其次， 本发明提供了miR ‑23b抑制剂在制备绵羊真皮成纤维细胞增 殖促进剂中的 应用， 所述 miR‑23b抑制剂为 miR‑23b inhibitor， 所述 miR‑23b inhibitor的序列如SEQ  ID  NO.6所示。 [0009]其次， 本发明提供了miR ‑23b抑制剂在制备绵羊真皮成纤维细胞中毛囊发育相关 基因表达促进剂中的应用， 其特征在于， 所述miR ‑23b抑制剂为miR ‑23b inhibitor， 所述 miR‑23b inhibitor的序列如SEQ  ID NO.6； 所述毛囊发育相关基因为： NOTC H1、 WNT10A和TGFβ 2； 所述基因表达促进剂为mRNA 表达促进剂和蛋白表达促进剂。 [0010]其次， 本发明提供了miR ‑23b促进剂在制备毛囊发育抑制剂中的应用， 所述miR ‑ 23b促进剂为miR ‑23b mimic， 所述miR ‑23b mimic的序列如SEQ  ID NO.4和SEQ ID NO.5所 示。说　明　书 1/7 页 3 CN 114854882 A 3