(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210919292.3 (22)申请日 2022.08.01 (66)本国优先权数据 202210412524.6 202 2.04.19 CN (71)申请人 刘琳 地址 450000 河南省郑州市郑东 新区阜外 大道1号 申请人 唐颢 (72)发明人 刘琳　唐颢　程晓雷　简冬冬　 邢珺月　崔存英　李亚南　黄丹青　 (74)专利代理 机构 郑州翊博专利代理事务所 (普通合伙) 41155 专利代理师 周玉青 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01)C12N 15/11(2006.01) G06F 17/18(2006.01) (54)发明名称 一种用于扩张型心肌病辅助诊断的生物标 志物及其应用 (57)摘要 本发明医药生物 技术领域， 涉及一种用于扩 张型心肌病辅助诊断的生物标志物及其应用， 所 述生物标志物为miR ‑126‑3p、 miR‑126‑5p、 miR‑ 26a‑5p、 miR‑30c‑5p中的至少一种。 检测所述生 物标志物在扩张型心肌病患者和正常对照人群 血清中的表达情况， 发现miR ‑126‑3p、 miR‑126‑ 5p、 miR‑26a‑5p、 miR‑30c‑5p在扩张型心肌病患 者血清中的表达水平均显著低于正常对照人群， 差异具有统计学意义。 而且， 本发明还提供了一 种用于扩张型心肌病辅助诊断的试剂盒， 该试剂 盒含有用于检测上述生物标志物的检测试剂。 本 发明通过检测人血清中miR ‑126‑3p、 miR‑126‑ 5p、 miR‑26a‑5p、 miR‑30c‑5p的水平， 可有效区分 扩张型心肌病患者与健康对照， 可用于DCM的辅 助诊断。 权利要求书2页 说明书9页 附图4页 CN 115418397 A 2022.12.02 CN 115418397 A 1.一种用于扩张型心肌病辅助诊断的生物标志物， 其特征在于， 所述生物标志物为 miR‑126‑3p、 miR‑126‑5p、 miR‑26a‑5p、 miR‑30c‑5p中的至少一种。 2.权利要求1所述生物标志物的检测试剂在制备扩 张型心肌病辅助诊断的产品中的应 用。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述产品通过RT ‑PCR、 实时定量PCR、 原位 杂交、 Northern Blotting、 芯片、 高通 量测序平台检测样本中所述 生物标志 物的表达水平。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述产品中含有扩增所述生物标志物的特 异性引物或与所述 生物标志 物杂交的探针。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 扩增所述生物标志物的特异性引物的核苷 酸序列如下： 扩增miR‑126‑3p的特异性引物的核苷酸序列为： miR126‑3p‑F： gcagtcgtaccgtgagt， miR126‑3p‑R： tccagtttttttttttttttcgca； 扩增miR‑126‑5p的特异性引物的核苷酸序列为： miR126‑5p‑F： cgcagcattattacttttggt， miR126‑5p‑R： ccagtttttttttttttttcgcgta； 扩增miR‑26a‑5p的特异性引物的核苷酸序列为： miR26a‑5p‑F： gcagttcaagtaatccaggatag， miR26a‑5p‑R： ggtccagtttttttttttttttagc； 扩增miR‑30c‑5p的特异性引物的核苷酸序列为： miR30c‑5p‑F： gcgcagtgtaaacatcctac， miR30c‑5p‑R： ccagtttttttttttttttgctgaga。 6.根据权利要求2 ‑5任一所述的应用， 其特征在于， 所述生物标志物为miR ‑126‑3p与 miR‑30c‑5p的组合时， 所述产品进行扩张型心肌病诊断时， 预测扩张型心肌病的概率计算 公式为： PRE(P＝DC M)＝1/(1+EXP( ‑(1.962‑3729×miR30c‑205.2×miR126‑3p)))； 所述生物标志物为miR ‑126‑3p、 miR‑30c‑5p与miR‑26a‑5p的组合时， 所述产品进行扩 张型心肌病诊断时， 预测扩张型心肌病的概 率计算公式为： PRE(P＝DCM)＝1/(1+EXP( ‑(2.427‑260.9×miR26a–2863×miR30c‑185.7×miR126‑ 3p)))； 所述生物标志物为miR ‑126‑3p、 miR‑30c‑5p、 miR‑26a‑5p与miR‑126‑5p的组合时， 所述 产品进行扩张型心肌病诊断时， 预测扩张型心肌病的概率计算公 式为： PRE(P＝DCM)＝1/(1 +EXP(‑(2.671‑226.1×miR26a‑2167×miR30c‑438.8×miR126‑5p‑183.7×miR126‑3p)))； 其中， PRE表示预测概率， EXP表示以自然常数e为底的指数函数， miR26a表示受试者样 本中miR‑26a‑5p表达量； miR30c表示受试者样本中miR ‑30c‑5p表达量； miR126 ‑5p表示受试 者样本中miR ‑126‑5p表达量； miR 126‑3p表示受试者样本中miR ‑126‑3p表达量。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述产品的检测样本为细胞、 组织、 全血、 血浆或血清； 所述产品为芯片、 制剂或试剂盒。 8.一种用于扩张型心肌病辅助诊断的试剂盒， 所述试剂盒中含有权利要求1所述生物权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115418397 A 2标志物的检测试剂。 9.根据权利要求8所述的试剂盒， 其特征在于， 所述检测试剂为通过RT ‑PCR、 实时定量 PCR、 原位杂交、 Northern  Blotting、 芯片、 高通量测序平台检测样本中所述生物标志物的 表达水平的试剂。 10.根据权利要求9所述试剂盒， 其特征在于， 所述生物标志物为miR ‑126‑3p与miR ‑ 30c‑5p的组合时， 所述试剂盒预测扩张型心肌病的概 率计算公式为： PRE(P＝DC M)＝1/(1+EXP( ‑(1.962‑3729×miR30c‑205.2×miR126‑3p)))； 所述生物标志物为miR ‑126‑3p、 miR‑30c‑5p与miR‑26a‑5p的组合时， 所述试剂盒预测 扩张型心肌病的概 率计算公式为： PRE(P＝DCM)＝1/(1+EXP( ‑(2.427‑260.9×miR26a–2863×miR30c‑185.7×miR126‑ 3p)))； 所述生物标志物为miR ‑126‑3p、 miR‑30c‑5p、 miR‑26a‑5p与miR‑126‑5p的组合时， 所述 试剂盒预测扩张型心肌病的概 率计算公式为： PRE(P＝DC M)＝1/(1+EXP( ‑(2.671‑226.1×miR26a‑2167×miR30c‑ 438.8×miR126‑5p‑183.7×miR126‑3p)))； 其中， PRE表示预测概率， EXP表示以自然常数e为底的指数函数， miR26a表示受试者样 本中的miR2 6a‑5p表达量； miR30c表示受试者样本中的miR30c ‑5p表达量； miR12 6‑5p表示受 试者样本中的miR 126‑5p表达量； miR126‑3p表示受试者样本中miR 126‑3p表达量。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115418397 A 3