(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210582160.6 (22)申请日 2022.05.26 (71)申请人 深圳市弘际生物科技有限责任公司 地址 518000 广东省深圳市南 山区粤海街 道高新区社区科技南路16号深圳海 科 技生态园11栋A2901 申请人 中国科学院生物 物理研究所 (72)发明人 姬广聚　刘群　王会文　杨智广　 毕友坤　 (74)专利代理 机构 北京悦和知识产权代理有限 公司 11714 专利代理师 司丽春　刘青霞 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01)C12N 15/113(2010.01) C12N 15/11(2006.01) G16B 25/10(2019.01) G16B 25/20(2019.01) G16H 50/20(2018.01) (54)发明名称 一种环状RNA在制备脑卒中诊断产品中的应 用 (57)摘要 本发明提供一种环状RNA在制备脑卒中诊断 产品中的应用， 属于环 状RNA医用领域， 提供一种 用于诊断、 辅助诊断或预后评估脑卒中的试剂 盒， 所述试剂盒包 括检测环状RNA ‑circ‑Magi1的 试剂和/或试纸和/或基因芯片， 环状RNA ‑circ‑ Magi1的核苷酸序列如SEQ  ID NO:1所示， 用于诊 断、 辅助诊断或预后评估脑卒中的检测系统、 环 状RNA‑circ‑Magi1的检测试剂在制备用于诊断、 辅助诊断或预后评估脑卒中的试剂盒、 试纸、 芯 片或高通量测序平台中的应用。 本发 明为脑卒中 的诊断或辅助诊断提供了一种快速、 准确、 廉价 的方法， 可以提高脑卒中的早期诊断的准确性， 以免错过黄金救治时间。 权利要求书1页 说明书8页 序列表3页 附图8页 CN 114752669 A 2022.07.15 CN 114752669 A 1.一种用于诊断、 辅助诊断或预后评估脑卒中的试剂盒， 其特征在于， 包括检测环状 RNA‑circ‑Magi1的试剂和/或试纸和/或基因芯片， 可选地， 所述环状RNA ‑circ‑Magi1的核 苷酸序列如SEQ  ID NO:1所示。 2.根据权利要求1所述的试剂盒， 其特征在于， 检测试剂包括引物和/或探针/和或芯 片， 检测引物为用于扩增所述环状RNA ‑circ‑Magi1的引物； 可选地， 检测引物包括如SEQ  ID NO:2和SEQ  ID NO:3所示的序列； 可选地， 检测引物为荧光定量PCR引物组， 用于检测环状RNA ‑circ‑Magi1的表达量； 可 选地， 还包括实时定量PCR所用试剂。 3.根据权利要求1或2所述的试剂盒， 其特 征在于， 还 包括RNA提取 试剂； 和/或， 还 包括cDNA逆转录试剂。 4.根据权利要求2或3所述的试剂盒， 其特征在于， 所述脑卒中为缺血性脑中风、 出血性 脑中风和腔隙性脑中风中的一种或几种。 5.一种用于诊断、 辅助诊断或预后评估脑卒中的检测系统， 其特征在于， 包括定量或相 对定量检测环状RNA ‑circ‑Magi1表达水平的检测系统和分析系统； 所述分析系统用于根据环状RNA ‑circ‑Magi1检测表达量诊断或预测脑卒 中； 所述分析 系统内存 储有预测或评估脑卒中的评分模型。 6.根据权利要求5所述的检测系统， 其特征在于， 所述环状RNA ‑circ‑Magi1的核苷酸序 列如SEQ ID NO： 1所示。 7.根据权利要求5或6所述的检测系统， 其特征在于， 所述检测系统包括权利要求3至5 任一所述的试剂盒。 8.根据权利要求5至7任一所述的检测系统， 其特征在于， 所述环状RNA ‑circ‑Magi1在 脑卒中病人 血液中表达高水平。 9.一种环状RNA‑circ‑Magi1的检测试剂在制备用于诊断、 辅助诊断或预后 评估脑卒中 的试剂盒、 试纸、 芯片或高通 量测序平台 中的应用。 10.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述环状RNA ‑circ‑Magi1的核苷酸序列 如SEQ ID NO： 1所示； 和/或， 所述检测试剂包括检测环状RNA ‑circ‑Magi1表达量的检测引物， 检测引物包括 如SEQ ID NO:2和SEQ  ID NO:3所示的序列； 和/或， 所述脑卒中为 缺血性脑中风、 出 血性脑中风和腔隙性脑中风中的一种或几种； 和/或， 所述环状RNA ‑circ‑Magi1的检测样本为全血或血清、 血浆； 和/或， 通过检测所述RNA ‑circ‑Magi1在血液中的存在量确定表达水平， 可选地， 所述 环状RNA‑circ‑Magi1在脑卒中病人 血液中表达高水平。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114752669 A 2一种环状RNA在制备脑卒中诊断产品中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及环状RNA医用领域， 具体涉及一种环状RNA ‑circ‑Magi1， 用于诊断、 辅 助诊断或预后评估脑卒中的试剂盒， 用于诊断、 辅助诊断或预后评估脑卒中的检测系统， 环 状RNA‑circ‑Magi1的检测试剂在制备用于诊断、 辅助诊断或预后评估脑卒中的试剂盒、 试 纸、 芯片或高通 量测序平台 中的应用。 背景技术 [0002]脑卒中(cerebral  stroke， 又称 中风)是由于脑部血管破裂或血管阻塞导致血液 不能流入大脑而引起脑组织损伤的急性脑血管疾病， 包括缺血性和出血性卒中。 脑卒中具 有高发病率， 高死亡率， 高致残 率， 高复发率等特点。 脑 卒中已成为我国第一位死亡原因， 也 是中国成年人残疾的首要原因。 [0003]目前， 常规的脑卒中诊断主要依靠临床症状辅以成像技术和血液检测。 血液分子 标志物日益成为成为帮助诊断的重要指征。 [0004]随着基因组学研究的日益深入， 越来越多的非编码RNA被鉴定出来， 它们在 基因表 达调控中的重要地位正在为人们所认知。 环状RNA(circRNA)是一类特殊的非编码RNA， 它是 一种在反向剪接过程中形成的共价闭合成环的非编码RNA。 在真核生物中， 环状RNA的表达 非常丰富， 在 多种器官组织广泛存在， 并表现出时空特异 性及组织特异 性， 同时它还具有进 化保守性。 环状RNA不含5 ’帽子结构与3 ’多腺苷酸尾巴结构， 在结构上是一个闭合的环， 不 易被核酸外切酶降解。 因此， 大多数环状RNA的半衰期超过48小 时， 而mRNA的平均半衰期仅 为10小时。 [0005]有研究报道环状RNA广泛地参与到多种疾病的发生发展过程中， 为疾病 发生发展 机制的阐明提供了理论支持， 并为多种疾病的诊断与治疗提供了新的研究思路。 环状RNA所 具有的组织特异 性、 疾病特异 性、 时序特异性以及高稳定性等特点， 使其在 疾病诊断标记物 方面表现出极佳的应用前 景。 [0006]临床上脑卒中的诊断主要通过计算机断层扫描(CT)和磁共振扫描(MRI)进行， 但 CT和MRI在脑 卒中的诊断方面也 都存在着一些局限之处。 首先， CT检查对于早期缺血性脑 卒 中的判断效果不佳， 脑梗塞发生24小时内梗死灶尚未完全形成前， CT扫描往往无法发现明 显异常， 同时， CT的辐射剂量大， 会对 人体产生一定的危害。 目前， 尚无能有效诊断脑 卒中的 血液检测指标(比如， 心梗除了超声心动图 以外， 血液检测需要辅助以cTNT等作为指标)， 而 MRI在脑卒中早期诊断一定程度上能够 弥补CT的不足， 但由于其工作原理， MRI对于装有心 脏起搏器和 体内有磁性金属的患者并不适用， 同时在费用上MRI也较为昂贵。 因此， 发现一 种快速、 准确、 廉价的脑卒中诊断方法成为 一个有待解决的重要领域。 发明内容 [0007]发明目的 [0008]本发明的目的在于提供一种环状RNA ‑circ‑Magi1， 用于诊断、 辅助诊断或预后评说　明　书 1/8 页 3 CN 114752669 A 3