(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210596652.0 (22)申请日 2022.05.30 (71)申请人 湖南华豚种猪股份有限公司 地址 410000 湖南省长 沙市芙蓉区雄天路 98号孵化楼 2号栋5楼501-01室 申请人 湖南农业大 学 (72)发明人 马海明　文利新　谭国华　刘杨　 (74)专利代理 机构 长沙市融智专利事务所(普 通合伙) 43114 专利代理师 袁靖 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种猪抗病力分子标记及其应用 (57)摘要 本发明属于家畜分子标记 技术领域， 具体涉 及一种猪抗病力分子标记及其应用。 本发明的 DNA分子标记由PCR扩增并经测序得到， 其 分子标 记的序列如SEQ  ID NO： 1所示， 是在SEQ  ID NO： 1 的第143bp位置的一个突变， 可以应用于安庆六 白猪抗病力筛选。 本发明为安庆六白猪抗病力的 提高提供了新的分子 遗传标记。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 附图1页 CN 115125306 A 2022.09.30 CN 115125306 A 1.一种猪抗病力分子标记， 其特征在于， 为SEQ  ID NO： 1所示序列的一个SNP突变； 第 143bp的位置发生G/T突变， 并产生G G、 GT和TT基因型。 2.根据权利要求1所述的分子标记， 其特征在于， SNP位点进行基因分型的引物对， 如下 所示， 正向引物为5 ′ ‑CCA AAC ATG GAG ATG CAG TTC‑3′， 反向引物为5 ′ ‑CAA TGA ATC AAT GAG CAC ACC‑3′。 3.权利要求1或2所述的分子标记的应用方法， 其特 征在于， 用于抗病能力强的选种。 4.根据权利要求3所述的应用方法， 其特 征在于， (1)获得待检测猪的基因 组DNA； (2)以上述猪 基因组DNA为模板， 采用如下引物对进行扩增， 获得含有突变位 点的片段； 正向引物为5 ′ ‑CCA AAC ATG GAG ATG CAG TTC‑3′， 反向引物为5 ′ ‑CAATGAATC AAT GAG CAC ACC‑3′； (3)通过琼脂糖凝胶电泳对上述扩增产物进行检测； (4)对PCR产物进行测序分析， 检测上述扩增片段内突变位 点多态性。 5.根据权利要求3所述的应用方法， 其特 征在于， 选种对象包括： 安庆六白猪。 6.用于将权利要求1所述的SNP位点进行基因分型的引物对， 其特征在于所述的引物序 列如下所示： 正向引物为5 ′ ‑CCA AAC ATG GAG ATG CAG TTC‑3′， 反向引物为5 ′ ‑CAA TGA ATC AAT GAG CAC ACC‑3′。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115125306 A 2一种猪抗病力分子标记及其应用 技术领域： [0001]本发明属于家畜分子生物学技术领域， 具体涉及一种猪抗病力分子标记及其应 用。 背景技术： [0002]安庆六白猪， 俗名 “六花猪”， 属肉脂兼用性地方品种。 该 品种全身被毛黑色， 额部﹑ 尾端和四肢均白色为其毛色特征， 故得六百之称。 安庆六白猪具有抗病性 强， 耐青粗饲料的 特性。 2006年， 安庆六白猪被农业部列为重点保护名录。 目前以订单方式建立了 “公司+基地 +农户”和“养殖生产计划+保底价回收承诺 ”的生产经营开发体系， 以纯种六白猪和含六白 猪血缘的内二元﹑ 内三元杂种猪为猪源， 开发生产腊肉﹑ 腌肉﹑ 肉丸﹑ 扣肉等 适销产品。 [0003]杀菌通透性蛋白基因(Bacter icidal/permeability ‑increasing  protein gene， BPI)最早在人的多形核中性粒细胞(poly ‑morphonuclear  neutrophils)的嗜天青颗粒中 被发现,属于脂多糖结合蛋白， 是中性粒细胞中发现的多种 具有抗微生物活性的蛋白分子 之一。 BPI基因在机体免疫应答调节和抵抗病毒感染方面有重要的作用， 其多态性与动物相 关病原的免疫力明显相关。 BPI蛋白是一种能够抗 感染的蛋白质， 储存于中性粒细胞， 有 “超 级抗生素”的称号。 [0004]本发明对安庆六白猪进行全基因组重测序， 并与其它猪的全基因组序列进行比 较， 鉴定安庆六白猪基因组中的SNP序列， 揭示安庆六白猪的序列差异。 本发明旨在挖掘安 庆六白猪的优异基因资源和筛选一般抗病力的标记， 为安庆六白猪的品牌开 发提供可靠的 理论依据。 发明内容： [0005]本发明的目的在于为安庆六白猪品种抗病力提供一种有用的分子遗传标记及其 具体的应用。 [0006]一种猪抗病力分子标记， 为SEQ  ID NO： 1所示序列(该序列属于杀菌通透性蛋白基 因(Bactericidal/permeability ‑increasing  protein gene， BPI)第10外显子)的一个SNP 突变。 [0007]扩增长度为445碱基的序列， 第 143bp的位置发生G/T突变， 导致限制性内切酶Hpa Ⅱ位点的改变， 并产生G G、 GT和TT基因型。 [0008]GG基因型扩增后对应电泳时只有一个片段； [0009]GT基因型扩增后对应电泳时有三个片段； [0010]TT基因型扩增后对应电泳时有两个片段。 [0011]根据所述的分子标记， SNP位 点进行基因分型的引物对， 如下 所示， [0012]正向引物为5 ′ ‑CCA AAC ATG GAG ATG CAG TTC‑3′， SEQ ID NO： 2； [0013]反向引物为5 ′ ‑CAA TGA ATC AAT GAG CAC ACC‑3′； SEQ ID NO： 3。 [0014]所述的分子标记的应用方法， 用于抗病能力强的选种。说　明　书 1/4 页 3 CN 115125306 A 3