(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211036618.4 (22)申请日 2022.08.29 (71)申请人 中国海洋大学 地址 266100 山东省青岛市崂山区松岭路 238号 (72)发明人 于日磊　 (74)专利代理 机构 北京象合知识产权代理事务 所(普通合伙) 11893 专利代理师 封明艳 (51)Int.Cl. C07K 7/08(2006.01) C07K 19/00(2006.01) C12N 15/11(2006.01) A61K 38/10(2006.01) A61P 29/00(2006.01)A61P 25/02(2006.01) A61P 25/00(2006.01) (54)发明名称 一种新型的镇痛多肽 (57)摘要 本申请提供了一种、 具有明显镇痛效果且活 性更好的作用于α9α 10nAChR的芋螺毒素的突 变体多肽， 其所述芋螺毒素的突变体为[S4Dap, S9Dap]； 本申请公开的芋螺毒素的突变体多肽用 于治疗或缓解神经痛、 成瘾、 帕金森症、 癫痫症、 局部缺血、 兴奋性神经元细胞死亡、 痴呆、 乳腺 癌、 肺癌、 脑脊髓炎、 癌症与癌症化疗、 化疗药物 诱导的疼痛、 酒精中毒、 坐骨神经痛、 糖尿病、 三 叉神经痛、 硬化症、 带状疱疹痛、 内脏疼痛、 机械 伤和手术伤、 艾滋病、 头部神经瘫痪、 药物中毒、 工业污染 中毒、 淋巴神经痛、 骨髓瘤、 多点运动神 经痛、 慢性先天性感觉神经病、 急性剧烈自发性 神经痛、 挤压神经痛、 脉管炎、 血管炎、 局部缺血、 尿毒症、 儿童胆汁、 肝脏疾病、 慢性呼吸障碍、 复 合神经痛、 多器官衰竭、 脓毒病/脓血症、 肝炎、 卟 啉症、 维生素缺乏、 慢性肝脏病、 原生胆汁硬化、 高血脂症、 麻疯病、 莱姆关节炎、 感觉神经束膜炎 或过敏症。 权利要求书1页 说明书8页 附图3页 CN 115260292 A 2022.11.01 CN 115260292 A 1.一种作用于α 9α 10nAChR的芋螺毒素的突变体多肽,所述芋螺毒素的突变体多肽包含 第4、 第9或第10位 点及其相互 组合位点的氨基酸 突变。 2.如权利要求2所述的芋螺毒素的突变体多肽， 所述位点的氨基酸突变是指由丝氨酸 突变为Dap。 3.如权利要求3所述的芋螺毒素的突变体多肽， 所述第4位和第9位同时由丝氨酸突变 为Dap的突变 体为[S4Dap,S9Dap]。 4.包含权利要求1 ‑7任一项所述芋螺毒素的突变体多肽的组合物， 所述组合物可以包 含制剂所需的载体或辅料。 5.包含权利要求1 ‑7任一项所述芋螺毒素的突变体多肽的融合蛋白， 所述融合蛋白通 过linker或连接臂将芋螺毒素的突变 体多肽与其它序列连接 。 6.编码权利要求1 ‑7任一项所述 芋螺毒素的突变 体多肽的核酸分子 。 7.表达权利要求1 ‑7任一项所述 芋螺毒素的构建体， 所述构建体包 含其核酸分子 。 8.表达权利要求1 ‑7任一项所述 芋螺毒素的宿主细胞。 9.包含权利要求1 ‑7任一项所述融芋螺毒素的突变体多肽的药物组合物， 所述药物组 合物包含药学上可接受的辅料。 10.权利要求1 ‑7任一项所述芋螺毒素的突变体多肽在制备治疗或预防由α9α 10nAChR 受体介导的疾病或病症中的应用， 其中所述疾病或病症包括神经痛、 成瘾、 帕金森症、 癫痫 症、 局部缺血、 兴奋性神经元细胞死亡、 痴呆、 乳腺癌、 肺癌、 脑脊髓炎、 癌症与癌症化疗、 化 疗药物诱导痛、 酒精中毒、 坐骨神经痛、 糖尿病诱 发痛、 三叉神经痛、 硬化症、 带状疱疹痛、 机 械伤和手术伤、 艾滋病诱发痛、 头部神经瘫痪、 药物中毒、 工业污染中毒、 淋巴神经痛、 骨髓 瘤、 多点运动神经痛、 慢性先天性感觉神经病、 急性剧烈 自发性神经痛、 挤压神经痛、 脉管 炎、 血管炎、 局 部缺血、 尿毒症、 儿童胆汁、 肝脏疾病、 慢性呼吸障碍、 复合神经痛、 多器官衰 竭、 脓毒病/脓血症、 肝炎、 卟啉症、 维生素缺乏、 慢 性肝脏病、 原 生胆汁硬化、 高血脂症、 麻疯 病、 莱姆关节炎、 感觉神经束膜炎或过 敏症。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115260292 A 2一种新型的镇痛多肽 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药领域。 具体涉及一种由作用 α 9α 10nAChR芋螺毒素突变体得到 的镇痛多肽 及其应用。 背景技术 [0002]芋螺毒素是由海洋软体动 物芋螺(Conu s)分泌的一类用于自卫和捕食的活性肽 类 毒素。 芋螺毒 素分子质量小， 通常由10 ‑30个氨基酸残基组成， 大多富含半胱氨 酸， 具有高度 保守的二硫键骨架。 芋螺毒素种类繁多， 可达10万种以上， 其一级结构多变， 但信号肽及前 导肽序列保守。 根据保守的信号肽序列， 芋螺毒素可分为： A、 M、 O、 I、 P、 S、 T等超家族   (superfamily)， 再依据家族中毒素的半胱氨酸骨架， 结合其药理活性， 又可分为α、 μ、 ω、 δ、 Ψ、 σ 、 λ、 κ、 γ等家族。 芋螺毒 素能特异性地作用于体内多种(钾、 钠、 钙等)离子通道、 细胞膜 上的各种神经递质和激素的受体， 从而干扰细胞或神经中的信号传递。 因此， 在治疗慢性疼 痛、 急性疼痛、 癫痫、 神经保护、 心血管疾病、 精神失常、 运动失调、 痉挛症、 癌症及中风等方 面具有广泛的应用前景。 如O ‑超家族中的ω ‑芋螺毒素可直接作用于钙 离子通道， 阻断痛觉 传递， 并具有镇痛效应。 由于芋螺毒素在作为分子探针用于神经药理研究及作为新型药物 前导物开发临床用新药方面具有极高的研究和利用价值。 在芋螺毒素中， ω ‑MVIIA来源于 海洋生物幻芋螺(Conus  magus， 也称僧袍芋螺)， 能特异地阻断钙离子通道， 阻止疼痛信号 的传导， 以其为有效成分的Ziconotide(商品名PrialtTM)已被FDA批准用于治疗慢性疼痛 (Terlau,Olivera.Conus  venoms:a  rich source of novel ionchannel ‑targeted   peptides.  Physiol Rev.2004,84:41 ‑68)。 芋螺毒素中的α 类芋螺毒素( α ‑Conotoxins)具 有阻断烟碱乙酰胆碱受体(nAChRs)的功能； 不含有半胱氨酸的芋螺毒素肽Conantokins则 具有阻断N ‑甲基‑D‑ 天冬氨酸受体(NMDA受体， N ‑methyl‑D‑aspartic  acid receptor， NMDAR)的功能。 [0003]在神经型nAChRs的各种亚型中， α9α 10亚型在生物医药领域备受关注。 α9α 10烟碱 型乙酰胆碱受体是由α 9和α 10两种亚基组成的跨膜五聚体， 是一种配体门控离子通道， 该 受 体最早被发现存在于耳蜗毛细胞中， 介导橄榄耳蜗胆碱能纤维和传出神经之间的突触传 递， 后被证明在白细胞、 背根神经节、 垂体、 皮肤角质细胞和精液中也有分布。 研究表明， 乙 酰胆碱受体中的α9α10亚型可能是治疗慢性疼痛， 特别是神经性疼痛的潜在靶点 (McIntosh,J.M.；  Absalom,N.； Chebib,M.； Elgoyhen,A.B.Vincler,M.,Alpha9  nicotinic   acetylcholine  receptors and  thetreatment  of pain.Biochemicalpharmacology   2009,78(7),693 ‑702.Satkunanathan,N.；  Livett,B.； Gayler,K.Sandall,D.； Down,J.； Khalil,Z.,Alpha ‑conotoxin  Vc1.1alleviates neuropathic  pain andaccelerates   functional  recovery  of injured neurones.Brain resear ch2005,1059(2),149 ‑58.)。 α 9α 10nAChR阻断剂具有治疗神经痛、 预防神经受伤、 和加 速受伤神经恢复的功能， 可能是通 过免疫机制发挥作用(Holtman,J.R.； Dwoskin,L.P.；  Dowell,C.； Wala,E.P.； Zhang,Z.； Crooks,P.A.； McIntosh,J.M.,The  novel small moleculealpha9alpha10  nicotinic  说　明　书 1/8 页 3 CN 115260292 A 3