(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210866435.9 (22)申请日 2022.07.21 (71)申请人 深圳赛陆医疗科技有限公司 地址 518000 广东省深圳市光明区凤 凰街 道塘尾社区恒泰 裕大厦3栋3A-1101 (72)发明人 张长领　王谷丰　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 专利代理师 刘燚 (51)Int.Cl. C12Q 1/6874(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/6834(2018.01) (54)发明名称 一种快速的二代基因测序方法 (57)摘要 本发明公开了一种快速的二代基因测序方 法。 该测序方法包括以下步骤： 聚合： 将检测复合 物连接到杂交于待测核酸分子的引物上， 检测复 合物上修饰有荧光基团和阻断基团； 采集： 激发 荧光基团产生荧光信号， 通过光学成像系统获取 成像光斑， 识别成像光斑得到碱基类型； 切除： 切 除阻断基团和荧光基团； 重复聚合 ‑采集‑切除的 循环； 其中， 采集在聚合的步骤开始后启动， 和/ 或， 切除在采集的步骤开始后启动。 根据本申请 的测序方法， 至少具有以下有益效果： 利用需要 消耗较长时间的信号采集期间进行未完成的合 成反应以及切除反应的准备工作， 通过这种方式 压缩单个循环的时间， 最终可以将整个测序流程 的时间大 大缩短。 权利要求书2页 说明书10页 附图2页 CN 115232867 A 2022.10.25 CN 115232867 A 1.测序方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 聚合： 将检测复合物连接到杂交于待测核酸分子的引物上， 所述检测复合物上修饰有 荧光基团和阻断基团； 采集： 激发所述 荧光基团产生 荧光信号， 识别所述 荧光信号得到 碱基类型； 切除： 切除所述阻断基团和荧 光基团； 重复所述聚合 ‑所述采集 ‑所述切除的循环； 其中， 所述采集在所述聚合的步骤开始后启动， 和/或， 所述切除在所述采集的步骤开 始后启动。 2.根据权利要求1所述的测序方法， 其特征在于， 所述将检测复合物连接到杂交于待测 核酸分子的引物上包括： 将检测复合物和聚合酶送入固相载体的表面， 所述表面固定有所述待测核酸分子， 所 述引物杂交于所述待测核酸分子； 在所述聚合酶的作用下， 所述检测复合物连接 到所述引物并发生阻断。 3.根据权利要求1所述的测序方法， 其特征在于， 所述检测复合物包括第 一核苷酸类似 物， 所述将检测复合物连接 到杂交于待测核酸分子的引物上包括： 将所述第一核苷酸类似物和所述聚合酶送入所述固相载体的所述表面； 在所述聚合酶的作用下， 所述第一核苷酸类似物连接到所述引物并发生阻断， 形成检 测复合物； 优选地， 所述采集在所述将第 一核苷酸类似物和聚合酶送入所述固相载体的所述表面 的步骤开始后启动。 4.根据权利要求3所述的测序方法， 其特征在于， 所述聚合步骤中， 在形成所述检测复 合物后还 包括： 将所述第二核苷酸类似物和所述聚合酶送入所述固相载体的所述表面； 在所述聚合酶的作用下， 所述第 二核苷酸类似物连接到未与第 一核苷酸类似物连接的 所述引物上并发生阻断； 优选地， 所述采集在所述将所述第 二核苷酸类似物和所述 聚合酶送入所述固相载体的 表面的步骤开始后启动。 5.根据权利要求4所述的测序方法， 其特征在于， 所述第 二核苷酸类似物修饰有阻断基 团。 6.根据权利要求4所述的测序方法， 其特征在于， 所述第 一核苷酸类似物修饰有荧光基 团和阻断基团。 7.根据权利要求2所述的测序方法， 其特 征在于， 所述固相载体为 流动槽。 8.根据权利要求2所述的测序方法， 其特征在于， 所述切除所述阻断基团和荧光基团包 括： 将切除试剂送入所述固相载体的表面， 切 除所述检测复合物中的阻断基团和荧光基 团； 优选地， 在切除之前， 将洗脱试剂送入所述固相载体的表面， 去除所述表面的残留试 剂； 优选地， 所述将洗脱试剂送入所述固相载体的表面， 去 除所述表面的残留试剂的步骤权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115232867 A 2在所述采集的步骤开始后启动。 9.根据权利要求1所述的测序方法， 其特征在于， 所述采集在所述 聚合的步骤开始后启 动为所述采集在所述聚合的步骤开始0～6 0s后启动。 10.根据权利要求1所述的测序方法， 其特征在于， 所述切除在所述采集的步骤开始后 启动为所述切除在所述采集的步骤开始0～10mi n后启动。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115232867 A 3