(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210697898.7 (22)申请日 2022.06.20 (71)申请人 甘肃农业大 学 地址 730070 甘肃省兰州市安宁区营门村1 号 (72)发明人 张小雪　程江博　李发弟　王维民　 张德印　李晓龙　张煜坤　赵源　 徐丹　李文馨　王江荟　赵利明　 林长春　周步博　 (74)专利代理 机构 北京智为时代知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11498 专利代理师 王加岭　杨静 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种与绵羊阶段体重性状相关的分子标记 及其应用 (57)摘要 本发明提供了一种与绵羊阶段体重性状相 关的分子标记及其应用。 该与绵羊阶段体重相关 的分子标记， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 其中第216bp处的Y表示T或C， 该突变导致分子标 记的T/C多态性。 本发明通过对绵羊OSMR基因进 行PCR扩增和序列分析， 对375只湖羊、 82只杜泊 羊和31只滩羊的基因进行检测和建立最小二乘 模型， 对基因型与阶段体重的性状进行关联分 析， 发现在扩增片段如SEQ  ID NO.1所示序列的 第216位存在一个T/C多态性位点， 最终确定了本 发明扩增的OSMR基因片段可以作为与绵羊阶段 体重相关的分子标记。 本发明通过检测分子标 记， 可用于选留基因为TT纯合型湖羊进入核心 群 作为种羊， 以绵羊的阶段体重， 有助于提高生产 的效率。 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 附图2页 CN 114941035 A 2022.08.26 CN 114941035 A 1.一种与绵羊阶段体重性状相关的分子标记， 其特征在于， 其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.1所示， 其中第216bp处的Y表示T或C， 该突变导 致分子标记的T/ C多态性。 2.一组检测权利要求1所述的分子标记的引物组， 其特征在于， 其包括核苷酸序列如 SEQ ID NO.2和SEQ  ID NO.3所示序列的正向引物和反向引物。 3.一组检测权利要求1所述的分子标记的KASPar引物组， 其特征在于， 其包括苷酸序列 如SEQ ID NO.4、 SEQ  ID NO.5和SEQ  ID NO.6所示的用于检测AlleleC的正向引物、 用于检 测AlleleT的正向引物和通用反向引物。 4.一种检测权利要求1所述的分子标记的试剂盒， 其特征在于， 其包含权利要求2 的引 物对或权利要求3所述的KAS Par引物对。 5.一种与绵羊阶段体重性状相关的分子标记的检测方法， 其包括如下步骤： 1)使用权利要求2的PCR引物组或权利要求3所述的KASPar引物组， 或者使用权利要求4 所述的检测试剂盒， 对湖羊基因 组DNA进行扩增； 2)对步骤1)获得扩增产物的多态性 位点进行分型鉴定 。 6.根据权利要求5所述的检测方法， 其特征在于， 步骤2)中的分型鉴定方法为直接测序 法、 荧光探针法、 基因芯片法或高分辨 率溶解曲线法。 7.根据权利要求5所述的检测方法， 其特征在于， 利用权利要求3所述的KASPar引物对 进行扩增， 扩增结束后， 再通过检测荧 光信号确定分型 结果。 8.权利要求1所述的分子标记或权利要求2或3所述的引物组， 或权利要求4所述的试剂 盒， 或权利要求5 ‑7中任一项所述的检测方法在绵羊阶段体重性状相关检测中的应用。 9.权利要求1所述的分子标记或权利要求2或3所述的引物对， 或权利要求4所述的试剂 盒， 或权利要求5 ‑7中任一项所述的检测方法在绵羊育种中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特 征在于， 所述育种的目的为培 育高产型绵羊。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114941035 A 2一种与绵羊阶段体重性状相关的分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明属于分子标记的技术领域， 具体涉及OSMR基因片段作为影响绵羊阶段体重 性状相关的分子标记及其应用。 背景技术 [0002]在肉羊的生产实践中， 阶段体重(Body  weight， BW)反映了绵羊产肉的能力， 其作 为衡量肉羊生产性能的一项重要的经济指标， 研究表明阶段体重属于中等遗传力(0.35～ 0.46)， 受遗传 控制且能够通过选择进行有效 改良； 但是有关绵羊阶段体重相关的候选基因 报道较少。 [0003]信号传导抑瘤素M受体(oncostat in M receptor， OS MR)是白细胞介素 ‑6因子家族 (IL‑6)的一员， 与细胞的生长、 增殖和分化密切相关(Hui， W.， et  al.， Oncostatin  M(OSM) stimulates  resorption  and inhibits  synthesis  of proteoglycan  in porcine  articular cartilage  explants.199 6.495‑500.)。 广泛存在于不同类型的细胞中， 并在身 体发育中发挥重要作用， 它主要在脂肪中表达， 并参与调节脂肪组织内稳态(Elks， C.M.， et   al.， Loss  of Oncostatin  M Signaling  in Adipocytes  Induces Insulin Resistance   and Adipose Tissue Inflammation  in Vivo.2016， 17066 ‑17076.)。 脂肪细胞的分化与发 育可以影响机体脂质的生成与发育， 进而影响其阶段体重。 阶段体重属于中等遗传力， 受到 基础代谢、 所 处环境、 饲料效率、 机体活动、 饲料营养等多种因素的影响。 但是OSMR基因与 绵 羊阶段体重是否有关系， 有什么关系并不清楚。 [0004]本发明通过对OSMR基因进行测 序和分析， 探讨其不同基因型与绵羊阶段体重的关 联性， 旨在为提高绵羊阶段体重的遗传改良方面提供基因素材， 加速 自主知识产权的高产 型优质肉羊新品种的培 育进程。 发明内容 [0005]本发明的目的在于克服现有技术的缺陷， 提供一种作为与绵羊阶段体重相关的分 子标记及其应用。 本发明的分子标记是从绵羊OSMR基因中扩增得到， 其核苷酸序列如SEQ   ID NO.1所示。 通过大量实验进行扩增绵羊OSMR基因序列并进行测序， 寻找OSMR基因的多态 性位点， 分析不同的基因型与 绵羊阶段体重相关性， 并建立该多态 性位点的检测方法， 将该 分子标记应用于高产型优质肉羊新品种的培 育中。 [0006]为实现上述目的， 本发明采用以下的技 术方案为： [0007]本发明的一方面提供了一种与绵羊阶段体重性状相关的分子标记， 该分子标记的 核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 其中第216bp位的Y表示T或C， 由于上述序列在第216位碱 基处有一个T/ C突变， 从而导 致了绵羊OSMR基因在该位 点的T/C多态性。 [0008]本发明的第二方面提供了一组检测上述分子标记的引物组， 任何可特异性扩增本 发明分子标记或包含上述多态性位点的片段的引物均适用于对该分子标记进 行检测， 优选 地， 其包括核苷酸序列如SEQ  ID NO.2和SEQ  ID NO.3所示序列的正向引物和反向引物。说　明　书 1/5 页 3 CN 114941035 A 3