(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210629609.X (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 中山大学附属第一医院 地址 510000 广东省广州市中山 二路58号 (72)发明人 区景松　刘泽龙　欧志君　李艳　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 薛红凡 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 hsa-miR-12 04在制备辅助诊断年龄相关AAD 的试剂中的应用及检测试剂盒 (57)摘要 本发明提供了hsa ‑miR‑1204在制备辅助诊 断年龄相关主动脉夹层动脉瘤的试剂中的应用 及检测试剂盒， 属于疾病诊断技术领域。 hsa ‑ miR‑1204在主动脉夹层动脉瘤患者， 特别是老年 患者血浆中异常高表达， 可以作为主动脉夹层动 脉瘤诊断的分子标志物。 基于实时荧光定量PCR 技术， 通过检测hsa ‑miR‑1204表达量诊断主动脉 夹层动脉瘤， 年长者(≥50岁)血浆hsa ‑miR‑1204 表达过高提示患有主动脉夹层动脉瘤风险， 年轻 人(<50岁)血浆hsa ‑miR‑1204表达过高亦有预测 价值。 本发明提供的方法具有检测方便灵敏， 成 本低廉等优点， 对疾病的早期诊断， 甚至预测有 重要价值。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图2页 CN 114774537 A 2022.07.22 CN 114774537 A 1.hsa‑miR‑1204作为分子标志物在制备辅助诊断年龄相关主动脉夹层动脉瘤的试剂 中的应用。 2.根据权利要求1所述应用， 其特征在于， 所述hsa ‑miR‑1204的核苷酸序列如SEQ  ID  NO:1所示。 3.检测hsa ‑miR‑1204表达量的试剂在制备辅助诊断年龄相 关主动脉夹层动脉瘤的试 剂盒中的应用。 4.根据权利 要求3所述应用， 其特征在于， 所述诊断基于qRT ‑PCR技术时， 所述试剂包括 正向引物和反应引物； 所述正向引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:3所示； 所述反向引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:4所示。 5.根据权利 要求4所述应用， 其特征在于， 所述hsa ‑miR‑1204表达量过高提示样本患有 主动脉夹层动脉瘤的风险。 6.根据权利要求5所述应用， 其特征在于， 所述hsa ‑miR‑1204表达量过高的判断标准 为‑ΔΔCq值。 7.根据权利要求 4所述应用， 其特 征在于， 所述试剂还 包括颈环法 反转录引物； 所述颈环法 反转录引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:2所示。 8.一种基于qRT ‑PCR技术辅助诊断年龄相关主动脉夹层动脉瘤的试剂盒， 其特征在于， 包括正向引物和反向引物； 所述正向引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:3所示； 所述反向引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:4所示。 9.根据权利要求8所述试剂盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包括qPCR检测用试剂和反转录 试剂。 10.根据权利要求9所述试剂盒， 其特 征在于， 所述反转录试剂包括颈环法 反转录引物； 所述颈环法 反转录引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:2所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114774537 A 2hsa‑miR‑1204在制备辅助诊断年龄相关A AD的试剂中的应用 及检测试剂盒 技术领域 [0001]本发明属于疾病诊断技术领域， 具体涉及 hsa‑miR‑1204在制备辅助 诊断年龄相关 主动脉夹层动脉瘤的试剂中的应用及检测试剂盒。 背景技术 [0002]主动脉夹层动 脉瘤(Aortic  Aneurysm  and Dissection,AAD)是指各种病因导致 的主动脉内膜和中层弹力膜撕裂， 局部主动脉壁扩张或膨出造成的严重主动脉疾病， 在临 床上具有自然病程进展 快， 病情凶险， 预后不良等特点。 主动脉夹层动脉瘤患者在发病前多 无明显症状和体征， 发病时在心电图、 X线胸片等检查中亦缺 乏特异性， 结合临床症状易被 误诊为心绞痛， 心肌梗死等， 而CT、 MRI、 主动脉造影虽能明确诊断,但费用高昂,操作复杂, 适用受限。 因此， 对于主动脉夹层动脉瘤患者的预测 和早期诊断是一个亟 待解决的问题。 [0003]微小RNA(microRNA)是一类长度在19 ‑24个核苷酸的非编码小分子RNA， 主要通过 与靶基因3'非翻译区结合来调控基因表达， 影响个体发育、 细胞增殖等生命活动过程。 血浆 中microRNA含量丰富， 目前已被证实对心血管疾病的发生发展具有重要的影响作用。 由于 血浆microRNA具有性质稳定， 易于检测等特点， 将其应用于主动脉夹层动脉瘤等心血管疾 病的预测、 早期诊断和个性化治疗均大有益处。 然而， 目前还 未有关于用于诊断与年龄相关 主动脉夹层动脉瘤的microRNA的研究报道。 发明内容 [0004]有鉴于此， 本 发明的目的在 于提供一种hs a‑miR‑1204在辅助诊断年龄相关主动脉 夹层动脉瘤中的应用。 [0005]本发明提供了hsa ‑miR‑1204作为分子标志物在制备辅助诊断年龄相关主动脉夹 层动脉瘤的试剂中的应用。 [0006]优选的， 所述hsa ‑miR‑1204的核苷酸序列如SEQ  ID NO:1所示。 [0007]本发明提供了检测hsa ‑miR‑1204表达量的试剂在制备辅助诊断年龄相关主动脉 夹层动脉瘤的试剂盒中的应用。 [0008]优选的， 所述诊断基于qRT ‑PCR技术时， 所述试剂包括 正向引物和反应引物； [0009]所述正向引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:3所示； [0010]所述反向引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:4所示。 [0011]优选的， 所述hsa ‑miR‑1204表达量过高提 示样本患有 主动脉夹层动脉瘤的风险。 [0012]优选的， 所述hsa ‑miR‑1204表达量过高的判断标准 为‑ΔΔCq值； [0013]优选的， 所述试剂包括颈环法 反转录引物； [0014]所述颈环法 反转录引物的核苷酸序列如SEQ  ID NO:2所示。 [0015]本发明提供了一种基于qRT ‑PCR技术辅助诊断年龄相关主动脉夹层动脉瘤的试剂 盒， 包括正向引物和反向引物；说　明　书 1/6 页 3 CN 114774537 A 3