(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210608147.3 (22)申请日 2022.05.31 (71)申请人 中国人民解 放军总医院第二医学中 心 地址 100853 北京市海淀区复兴 路28号 (72)发明人 白永怿　刘宏斌　 (74)专利代理 机构 北京领科知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 11690 专利代理师 徐丹丹　张丹 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12N 15/113(2010.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 circRNA标志 物及其应用 (57)摘要 本发明提供一种诊断和/或预后评估 血管重 构或其相关疾病的circRNA及其应用， 所述 circRNA为has_circ026271、 has_c irc026272和/ 或rno_circ_0017665。 较健康个体相比， 血管重 构或其相关疾病个体外周血和/或组织的has_ circ 026271、 has_circ  026272和/或rno_c irc_ 0017665显著上调， 通过检测circRNA的表达量， 可以准确的诊断血管重构或其相关疾病或心血 管疾病。 权利要求书1页 说明书10页 序列表2页 附图4页 CN 114908156 A 2022.08.16 CN 114908156 A 1.circRNA作为生物标志物在制备诊断和/或预后评估血管重构或其相 关疾病的产品 中的应用， 其特 征在于， 所述的circRNA来源于Dip2b基因。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述的circRNA包括SEQ  ID NO： 1、 SEQ  ID  NO： 2和/或SEQ  ID NO： 3转录的核苷酸序列， 或包括与SEQ  ID NO： 1、 SEQ  ID NO： 2和/或SEQ   ID NO： 3转录的核苷酸序列具有80％以上同源性的核苷酸序列。 3.根据权利要求1或2所述的应用， 其特征在于， 所述的诊断和/或预后评估血管重构 或 其相关疾病包括检测circRNA的表达量， 优选的， 检测circRNA的表达量使用的引物如SEQ   ID NO： 4和SEQ  ID NO： 5所示， 和/或， 如SEQ  ID NO： 6和SEQ  ID NO： 7所示。 4.circRNA或检测circRNA的试剂在制备诊断和/或预后 评估血管重构或其相关疾病的 产品中的应用， 其特 征在于， 所述的circRNA来源于Dip2b基因。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述的检测circRNA的试剂为检测circRNA 表达量的试剂， 所述的检测circRNA的试剂中包含引物， 所述的引物如SEQ  ID NO： 4和SEQ   ID NO： 5所示， 和/或， 如SEQ  ID NO： 6、 SEQ ID NO： 7所示。 6.根据权利要求1 ‑5任一所述的应用， 其特征在于， 所述的血管重构相关疾病包括血管 成形术后再狭窄、 肺动脉高压、 高血压、 冠心病、 颈动脉狭窄、 动脉粥样硬化、 糖尿病或脑卒 中。 7.一种诊断和/或预后评估血管重构 或其相关疾病的引物， 其特征在于， 所述的引物如 SEQ ID NO： 4和SEQ  ID NO： 5所示， 和/或， 所述的引物如SEQ  ID NO： 6和SEQ  ID NO： 7所示。 8.一种血管重构或其相关疾病的诊断试剂盒， 其特征在于， 所述诊断试剂盒包含权利 要求7所述的引物。 9.根据权利要求8所述的诊断试剂 盒， 其特征在于， 所述的血管重构相关疾病 包括血管 成形术后再狭窄、 肺动脉高压、 高血压、 冠心病、 颈动脉狭窄、 动脉粥样硬化、 糖尿病或脑卒 中。 10.权利要求7所述的引物、 权利要求8 ‑9任一所述的诊断试剂 盒在制备诊断和/或预后 评估血管重构或其相关疾病的产品中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114908156 A 2circRNA标志物及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 具体涉及用于血管重构或其相关疾病或心血管疾病诊 断和/或预后评估的circRNA。 背景技术 [0002]血管重构是血管为适应内外环境变化而发生的结构和功能改变。 这个过程包括血 管壁细胞的增生， 肥大， 凋亡， 细胞迁移， 细胞外基质的产生及降解等细胞生物学变化。 血管 重构可分为肥厚性血管重构与非肥厚性血管重构， 两者以一定比例共存于同一血管上。 非 肥厚性血管重构的主要 特征是血管外径明显减少， 内径明显减少， 中膜横截面积不变， 血管 平滑肌细胞发生重排； 肥厚性血管重构的主要特征是内径明显减少， 中膜横截面积增加， 血 管平滑肌细胞增生。 血管重构是肺动脉高压、 原发性高血压和动脉粥样硬化等相关疾病恶 化的重要病理基础或也是此类疾病发生发展的重要病因， 其发生隐匿， 目前判断主要依据 超声诊断。 但是， 如何在 疾病发生之初， 识别血管发生变化， 对于逆转或减轻血管重构， 保护 靶器官， 是一个巨大的挑战。 [0003]circRNA(circular  RNA， 环状RNA)是一类由特殊剪切机制形成的、 具有闭合环状 结构的非编码RNA(non ‑coding RNA， ncRNA)， 通过转录调控在生理及病理过程中发挥作用。 circRNA的组织特异 性、 疾病特异 性、 时序特异 性及高稳定性等特点使其 成为潜在的临床疾 病的生物标记物。 目前关于circRNA作为生物标志物在 多种疾病中都得到了验证， 尤其是癌 症领域， 例如肺癌、 乳腺癌等都已找出高灵敏度的circRNA指标作为生物标志物 来辅助临床 诊断。 近年来circRNA在疾病中的作用机制也成为研 究热点， 使circRNA生物标志物成为诊 断、 治疗疾病靶点的关键分子， 例如专利 CN113278690A公开了环状RNA  circ‑26782在制备 脊髓损伤诊疗药物中的应用； 专利CN113249478A公开了hsa_circ_0068464作为标志物在制 备结直肠癌诊断及预后药物中的应用。 [0004]非专利文献(郭欣,范春雨.环状RNA在心血管疾病中的研究现状及展望[J].中西 医结合心脑血管病杂志,2021,19(07):1118 ‑1120； 曾晓辉,卢帅,汪朝晖.心血管疾病中环 状RNA的研究现状[J].河北医药,2021,43(18):2839 ‑2843.)公开了hsa ‑circ‑0005870、 hsa_circ_01269 91等可能成为诊断高血压疾病的新型生物标志 物。 [0005]另外， 非专利文献： Dip2b基因在肺发育中的作用研究(杨安澜， 东北师范大学， 2019)和非专利文献： Dip2a与Dip2b的基因功能研究(班路莹， 东北师范大学， 2016)公开了 Dip2b基因是冠心病相关的超增强子(super  enhancer)发生单核苷酸多态性变异(SNP)的 位点之一， Dip2b基因通过调节shh基因和Wnt5a基因的表达水平调控肺的发育， 在敲除 Dip2b基因后， 通过调控心脏发育相关通路导 致心脏发育异常， 并最终导 致新生小鼠死 亡。 [0006]但在Dip2b基因中转录出的circRNA与血管重构或其相关疾病或心血管疾病之间 关系的研究未 见报道。说　明　书 1/10 页 3 CN 114908156 A 3