ICS 65.020.01 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2186.6—2012 微生物农药毒理学试验准则 第6部分：繁殖/生育影响试验 Microbial pesticide toxicological test guidelines- Part 6 : Reproductive/fertility effects study 行业标准信息服务平台 2012-06-06 发布 2012-09-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 2186. 6—2012 前 言 NY/T2186《微生物农药毒理学试验准则》分为以下几部分： 第1部分：急性经口毒性/致病性试验； 第2部分：急性经呼吸道毒性/致病性试验； 第3部分：急性注射毒性/致病性试验； 第4部分：细胞培养试验； 第5部分：亚慢性毒性/致病性试验； 第6部分：繁殖/生育影响试验。 本部分为《微生物农药毒理学试验准则》的第6部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分由中华人民共和国农业部种植业管理司提出并归口。 本部分起草单位：农业部农药检定所。 本部分主要起草人：张丽英、陶传江、李敏、孟宇晰、闫艺舟、叶纪明。 行业标准信息服务平 I NY/T 2186.6-2012 微生物农药毒理学试验准则 第6部分：繁殖/生育影响试验 1 范围 本部分规定了繁殖/生育影响试验的基本原则、方法和要求。 本部分适用于为微生物农药登记而进行的繁殖/生育影响试验。 2 试验目的 了解微生物农药对实验动物生育和胚胎及胎仔发育的影响，同时也评价微生物农药的垂直感染作 用。 3试验概述 在亲代动物交配前和雌性动物受孕后的妊娠期，给予微生物农药，观察实验动物的反应，定量检测 动物体内的受试微生物，分娩后检查子代情况，评价对动物生殖机能和胚胎发育等的影响 4受试物 受试物一般为微生物农药原药。通常以下几种微生物农药需要进行本试验： a）在亚慢性毒性/致病性试验中出现明显感染性，但没有毒性或致病性的微生物农药； 与已知哺乳动物体内寄生的微生物虽然分类不完全相同，但有一定关联的微生物农药 c） d）产品未充分纯化，可能含有哺乳动物寄生性污染物的微生物农药。 5试验步骤 5.1动物选择 5.1.1种属和品系 首选大鼠或小鼠，应使用实验室常用的品系。选用其他种属动物应说明理由。实验动物应不携带 特定微生物或寄生虫，不能使用低生育力的品种。 5.1.2年龄和性别 第一次给药前，实验动物为6周龄8周龄。为全面了解受试物对实验动物生育力的影响，需对雌 性和雄性动物同时进行试验。 5.1.3数量 每个试验组和对照组需要至少20只雄性动物和足够的雌性动物，以保证每组能得到至少20只孕 鼠。 5.2对照组 5.2. 1 需要设一个平行的未经处理的对照组。 5.2.2一般不需要设单独的溶剂或介质对照组，除非溶剂或介质的毒性未知。 5.2.3 3必要时，设立给予灭活受试物的对照组。 5.3给药方案 1 NY/T 2186.6—2012 5.3.1给药剂量 剂量的定量宜和试验同步进行。 5.3.2给药途径 一般采用经口给药。如果以前试验中仅在其他给药途径观察到受试物的持久性或感染性，则应采 用相应的给药途径。 5.3.3给药频率 给药频率应能保证交配前和交配期的亲代，以及孕期母体体内的受试物维持在显著水平。 5.4观察期 观察持续时间应该从亲代给予受试物开始到分娩以及子代处死整个期间。 5.5动物观察 5.5.1每天对所有实验动物至少进行一次仔细的临床观察。每天应进行必要的额外观察，并采取适 当措施，如：死亡动物的解剖检查和体内微生物农药的定量检测，虚弱或濒死动物的隔离检查，以尽可能 减少试验中动物信息的丢失。 5.5.2笼旁观察应包括，但不限于以下方面的变化： a）皮肤和被毛； b）眼睛和黏膜； c）呼吸系统； d) 循环系统； e）自主神经和中枢神经系统； f)） 身体活动性； g）行为方式。 应特别注意观察震颤、抽搐、腹泻、无力、流涎、睡眠和昏迷等体征。 5.5.3给药前、给药后每周、死亡或处死时，称量实验动物的体重。尽量准确记录动物的死亡时间。 5.6亲代交配 亲代雌雄动物按1：1比例同笼交配。将一一只雌性动物与一只随机选择的雄性动物同笼饲养，直到 雌性动物受孕或3周后。如同笼3周后仍未受孕则停止交配，作为不孕处理。每天早上检查雌性动物 阴道内是否有精子或阴栓，以发现精子或阴栓的当日作为受孕的第0d。交配期间应避免雌性动物与其 他雄性动物发生交配。 5.7特殊饲养 临近分娩的雌性动物应在分娩笼或产笼中单独饲养，并给予筑窝材料。笼子和材料应无受试物的 污染。妊娠雌性动物在分笼前停止给药。 5.8妊娠雌性动物的观察 5.8.1除本部分5.5规定的观察内容外，还要记录摄食量和延迟分娩情况。从受孕的第0d开始计算 妊娠期。 5.8.2分娩后尽快检查每窝情况，包括胎仔数、死产数、活产数、机体结构及行为异常的情况。 5.8.3 出生时或出生后立即称量幼鼠体重并计算每窝的重量。 5.9 亲代和子代体内受试物的定量检测 5.9.1 5.9.2 雌性动物产仔后，尽快对其器官、组织和体液进行受试物的定量检测。 5.9.3 出生后的第1d,对每窝幼鼠体内的受试物进行定量检测。 2 NY/T 2186. 6-2012 6试验数据和报告 6.11 试验结果评价 试验结果的评价包括受试物引起实验动物的所有效应，所有观察结果，受试物、亲代和子代体内的 微生物定量检测结果，亲代体内受试微生物维持显著水平的证据，给药方案和动物体重等。试验结果还 应该包括亲代携带受试微生物与出现繁殖和生育异常作用之间关系的评价。 6. 2 2试验报告 试验报告至少应包括以下内容： a）试验名称、试验单位名称和联系方式、报告编号； b) 试验委托单位和联系方式、样品受理日期和封样情况； c) 试验开始和结束日期、试验项目负责人、试验单位技术负责人、签发日期； d) 试验摘要； e) 受试物基本信息； f) 实验动物情况； 剂量和组别； g) h) 试验条件和方法； 试验结果： 1） 生育力指数和妊娠期长短； 3) 对繁殖和子代的影响； 每种异常体征发生的时间，包括致病性及后继结果； 5） 亲代和子代的体重； 大体解剖检查结果； 6） 微生物的定量方法； 7) 8） 对结果进行的统计学处理等。 j) 试验结论； k) 原始记录保存情况的说明。 行业标准信息服务平 3 NY/T 2186. 6-2012 6试验数据和报告 6.11 试验结果评价 试验结果的评价包括受试物引起实验动物的所有效应，所有观察结果，受试物、亲代和子代体内的 微生物定量检测结果，亲代体内受试微生物维持显著水平的证据，给药方案和动物体重等。试验结果还 应该包括亲代携带受试微生物与出现繁殖和生育异常作用之间关系的评价。 6. 2 2试验报告 试验报告至少应包括以下内容： a）试验名称、试验单位名称和联系方式、报告编号； b) 试验委托单位和联系方式、样品受理日期和封样情况； c) 试验开始和结束日期、试验项目负责人、试验单位技术负责人、签发日期； d) 试验摘要； e) 受试物基本信息； f) 实验动物情况； 剂量和组别； g) h) 试验条件和方法； 试验结果： 1） 生育力指数和妊娠期长短； 3) 对繁殖和子代的影响； 每种异常体征发生的时间，包括致病性及后继结果； 5） 亲代和子代的体重； 大体解剖检查结果； 6） 微生物的定量方法； 7) 8） 对结果进行的统计学处理等。 j) 试验结论； k) 原始记录保存情况的说明。 行业标准信息服务平 3 NY/T 2186. 6-2012 6试验数据和报告 6.11 试验结果评价 试验结果的评价包括受试物引起实验动物的所有效应，所有观察结果，受试物、亲代和子代体内的 微生物定量检测结果，亲代体内受试微生物维持显著水平的证据，给药方案和动物体重等。试验结果还 应该包括亲代携带受试微生物与出现繁殖和生育异常作用之间关系的评价。 6. 2 2试验报告 试验报告至少应包括以下内容： a）试验名称、试验单位名称和联系方式、报告编号； b) 试验委托单位和联系方式、样品受理日期和封样情况； c) 试验开始和结束日期、试验项目负责人、试验单位技术负责人、签发日期； d) 试验摘要； e) 受试物基本信息； f) 实验动物情况； 剂量和组别； g) h) 试验条件和方法； 试验结果： 1） 生育力指数和妊娠期长短； 3) 对繁殖和子代的影响； 每种异常体征发生的时间，包括致病性及后继结果； 5） 亲代和子代的体重； 大体解剖检查结果； 6） 微生物的定量方法； 7) 8） 对结果进行的统计学处理等。 j) 试验结论； k) 原始记录保存情况的说明。 行业标准信息服务平 3