ICS 65.100 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3282.3—2018 真菌微生物农药 金龟子绿僵菌 第3部分：金龟子绿僵菌可湿性粉剂 Fungal pesticides-Metarhizium anisopliae- Part 3:Metarhizium anisopliae wettable powder (WP) 行业标准信息服务平台 2018-07-27发布 2018-12-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3282.3—2018 前 NY/T3282《真菌微生物农药金龟子绿僵菌》分为3个部分： 第1部分：金龟子绿僵菌母药； 第2部分：金龟子绿僵菌油悬浮剂； 第3部分：金龟子绿僵菌可湿性粉剂。 本部分为NY/T3282的第3部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本部分由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本部分起草单位：农业农村部农药检定所、重庆大学、重庆重大生物技术发展有限公司。 本部分主要起草人：郭明程、王中康、杨峻、殷幼平、王晓军、李向英、胡丽。 行业标准信息服务平台 NY/T3282.3—2018 真菌微生物农药金龟子绿僵菌 第3部分：金龟子绿僵菌可湿性粉剂 1范围 本部分规定了真菌微生物农药金龟子绿僵菌可湿性粉剂的术语和定义、要求、试验方法、产品的检 验和验收，以及标志、标签、包装、储运、安全和保质期。 本部分适用于由真菌农药母药与适宜的助剂和填料加工而成的金龟子绿僵菌可湿性粉剂。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T1911 包装储运图示标志 GB/T1601 农药pH值的测定方法 GB/T1604 商品农药验收规则 GB/T 1605 商品农药采样方法 GB3796农药包装通则 GB/T5451 农药可湿性粉剂润湿性测定方法 GB/T8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定 GB/T14825 农药悬浮率测定方法 GB/T16150 农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法 NY/T3282.1真菌微生物农药金龟子绿僵菌第1部分：金龟子绿僵菌母药 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3. 1 金龟子绿僵菌可湿性粉剂Metarhiziumanisopliaewettablepowder（WP） 由金龟子绿僵菌母药与适宜的填料及助剂加工成的可分散于水中形成的悬浮液的粉状制剂。 3.2 润湿时间wettingtime 将一定量的可湿性粉剂从规定的高度倾入盛有一定量标准硬水的烧杯中，测定其完全润湿的时间。 3.3 含孢量sporecontent 每单位金龟子绿僵菌可湿性粉剂样品中所含金龟子绿僵菌孢子的数量。 3. 4 活孢率percentageof livingspores 即孢子萌发率，指在一定培养条件下，萌发的金龟子绿僵菌孢子数占总孢子数的百分率。 3. 5 菌落形成单位colonyformingunits(CFU) 1 NY/T3282.3—2018 以涂布方法，使单个分生孢子分散生长在营养琼脂培养基上，每一活孢子形成一个菌落，即为菌落 形成单位（CFU）。 3. 6 杂菌率rateofmicrobial contaminants 金龟子绿僵菌母药样品中除绿僵菌孢子外，其他菌（真菌和细菌等）量与总菌量的百分率。 3.7 储存稳定性 storage stability 金龟子绿僵菌可湿性粉剂样品在室温或低于室温下存储一定时间后，产品的活孢数与其标明值的 相对百分率。 4 要求 4.1 组成和外观 RD 外观通常呈灰白色至浅 金龟子绿僵菌可 湿性粉剂由真南农 的助剂 制成 不国颜色偶有 差异，但应为 应有结块。 绿色均匀疏松粉末 发酵基质的 4.2规范项目及 指标 金龟子绿僵菌可 湿性精剂 质量控制顶 金龟子绿菌可湿性粉剂控制项目指机 S 含孢量，亿孢 活孢率，% 杂菌率，% 干燥减量，% 细度（通过1 悬浮率，% pH 湿润时间，s 储存稳定性”，% 定期检测项目 5 试验方法 5.1一般规定 水溶液 除非另有说明，试验方法所用试剂级别为化学 5.2抽样 按照GB/T1605规定进行样品的采集，用随机数表法确样的包装件，最终抽样量不少于 300g。采样时，应特别注意样品的代表性和避免污染，采集容器和采样工具应经过消毒灭菌。样品采 集后，应立即检验。若不能立即检验，可储存在4℃冰箱中。 5.3菌种鉴别试验 有效成分的特征描述参见附录A。 将可湿性粉剂湿润、稀释后，均匀涂布在萨氏培养基1/4SDAY平板上，选择典型单菌落菌株作为 代表菌株，并按照附录B进行菌种鉴别。 5.4含孢量测定 按照NY/T3282.1中5.4的规定进行测定。 5.5活孢率测定 2 NY/T3282.3—2018 按照附录B的规定进行测定。 5.6杂菌率测定 按照NY/T3282.1中5.4的规定测定样品的杂菌率。 5.7干燥减量测定 按照NY/T3282.1中5.7规定的方法测定样品的干燥减量。 5.8细度测定 按照GB/T16150的规定进行测定。 5.9pH测定 按照GB/T1601的规定执行。 5.10湿润时间测定 按照GB/T5451的规定执行。 5.11悬浮率的测定 5.11.1方法提要 将试样于具塞量筒中，在（30土2)℃恒温箱内静置30min后，通过分别测定底部1/10悬浮液与上 悬浮液的含孢量，计算绿僵菌可湿性粉剂样品的悬浮率。 5.11.2仪器及设备 三角瓶：250mL。 磨口具塞玻璃量筒：250mL（内径38.5mm~40mm，刻度间距20.0cm~21.5cm，250mL刻度线 与瓶塞底部间距4cm~6cm）。 真空泵。 恒温箱：控温误差土2℃。 光学显微镜：目镜X物镜=400倍。 水平振荡仪：转速≥100r/min。 亮线血球计数板：25×16。 微量移液器：0.2mL~1.0mL。 手动计数器：1~9999。 5.11.3试验步骤 将250mL试样充分摇匀后倒人250mL具塞量筒，盖上瓶塞在1min内上下颠倒30次，使之充分 均匀。直立量筒，打开塞子，静置约30秒。用微量移液器快速从量筒中取样（约5mL），按照NY/T 3282.1中5.4的规定测定悬浮液的含孢量c1。再将具塞量筒放人（30士2)℃超级恒温器中静止恒温 30min。轻轻取出，并用一接有真空泵的吸管将瓶中菌液由上液面逐渐向下吸出225mL，盛于三角瓶 中（此为上悬液）。控制整个操作过程在15s30s内完成。 量筒中所剩孢子悬浮液为下悬液，测定量筒底部剩余的25mL悬浮液，按照NY/T3282.1中5.4 的规定测定其含孢量c2，计算悬浮率。 5.11.4测定结果 试样的总悬浮率Wi按式（1）计算。 100X(10ci-c2) (1) 250c1 9c1 式中： 一试样的总悬浮率，单位为百分率（%）； C1 静置前悬浮液含孢量，单位为亿孢子每毫升（亿孢子/mL）； 静置后底部1/10悬浮液含孢量，单位为亿孢子每毫升（亿孢子/mL）。 C2 3 NY/T3282.3—2018 5. 12 储存稳定性 5.12.1方法提要 将试样密闭放置于5℃储存12个月或15℃～25℃储存6个月后，按照附录B规定的方法测定活孢 率。储存后不低于活孢率初始值的80%。 5.12.2仪器及设备 冰箱：5℃% 样品柜：室内控温范围15℃~25℃。 棕色磨口玻璃瓶：带有磨口瓶塞，确保样品密闭。 5.12.3试验步骤 将20g试样放在玻璃瓶中，使其铺成平滑均匀层。密封后，置于5℃冰箱中放置12个月或15℃~ 25℃恒温箱中放置6个月。最后，按照附录B的规定测定活孢率。 6产品的检验和验收 应符合GB/T1604的规定。极限数值处理应按照GB/T8170中4.3.3的要求执行。 7标志、标签、包装、储运安全和保质期 7.1标志、标签 应符合GB3796的规定，同时注明储运条件。 7.2包装 应符合GB3796和GB/T191的规定。 7.3储运 储运时，应防止日晒及35℃以上高温，置于阴凉干燥处。运输时，注意轻放，防止破损。不得与有 毒有害物质混装、混运。 7.4安全 在使用说明书或包装标签上应注明毒性、防护措施等。 7.5保质期 在本部分的储存条件下，质量保证期从生产日期算起，12个月内产品活孢率不低于标示值。 标准信息服务平台 4 NY/T 3282.3—2018 附录A （资料性附录） 金龟子绿僵菌有效成分描述 A.1中文通用名称 金龟子绿僵菌。 A.2拉丁文学名 Metarhizium anisopliae A.3生物学分类地位 菌物界、子囊菌门Ascomycota、盘菌亚门Pezizomycotina、粪壳菌纲Sordariomycetes、肉座菌亚纲 Hypocreomycetidae、肉座菌目Hypocreales、麦角菌科Clavicipitaceae、绿僵菌属Metarhizium、金龟子 绿僵菌Metarhiziumanisopliae。 A.4生物学特性 A.4.1菌落特征 在1/4SDAY培养基上菌落初期白色，背面可见淡黄色色素，后期产孢后呈暗绿色，分生孢子聚集 成堆。菌株可以在SDAY上28℃生长1周，直径可达3.5cm。 A.4.2形态特征 菌丝具分枝分隔，粗1.4μm~2.1μm。瓶梗型产孢细胞，大小幅度为（2.1~2.9）μm×（7.1~ 7.5）um；从瓶梗顶端产生分生孢子链；孢子链连接点倾斜度小；分生孢子单细胞，长椭圆形至近柱状，两 端钝圆形。分生孢